SEM和TEM电子显微镜

1932年电子显微镜的出现为观察小的亚细胞结构和病毒打开了大门,这些都超出了光学显微镜的范围,不能分辨距离小于0.2μm的物体。

事实:1986年,恩斯特·鲁斯卡因其在电子选择方面的基础性工作而获得诺贝尔物理学奖,而在第一台电子显微镜的设计上,另一半的奖项联合授予了盖德·宾尼格和海因里希·罗勒,以表彰他们“对扫描隧道显微镜的设计”。

电子显微镜(图片来源)

电子显微镜使用电子束穿过真空,电磁铁被用来聚焦电子束。虽然电子显微镜价格昂贵,而且需要更多的空间来安装设备,但它所产生的电子显微照片证明了资本投资是值得的。通过EM产生的微小生物结构的更多细节有助于研究突破的推进。

五个基本步骤所有电子显微镜都涉及:

  1. 高压电子流(通常是5-100 KeV)由电子源(通常是加热的钨或场发射灯丝)形成,并在真空中利用正电势向试样加速。
  2. 利用金属孔和磁透镜将这种流限制和聚焦成一种细的、聚焦的单色光束。
  3. 这束光通过电磁透镜聚焦在样品上。
  4. 相互作用发生在辐照样品内部,影响电子束。
  5. 这些相互作用和效果被检测并转化为图像。

电子显微镜有几种类型,根据其最终用途进行分类。透射电子显微镜和扫描电子显微镜是两种最常见的类型电子显微镜

由TEM和SEM产生的大肠杆菌的彩色电子显微照片(来源:TEM- dennis kunkel/照片,TEM- david M.Phillips/Visuals Unlimited)

扫描电镜与透射电镜的主要区别如下:

属性 扫描电镜(SEM) 透射电子显微镜(TEM)
光源 扫描电镜是基于散射电子,即从样品表面发射的电子。它是立体光学显微镜的EM模拟物。 电子被用作“光源”。TEM是基于传输电子它的工作原理与光学显微镜相同。
目的 扫描电镜提供了细胞表面的详细图像。SEM关注的是样品的表面及其成分,所以SEM只能显示样品的形貌。 透射电子显微镜用于观察薄标本(组织切片、分子等)。透射电镜可以显示样品的许多特征,如内部组成、形貌、结晶等。
样品制备 样品表面涂有一层薄薄的重金属,如金或钯。 透射电镜样品需切薄(70 - 90纳米),因为电子不能深入材料。
决议 扫描电镜可以分辨近20纳米的物体。 TEM的分辨率比SEM高得多。它可以分辨近1nm的物体也就是降到接近原子的水平。
放大 扫描电镜放大倍数可达50000倍。 放大率是TEM所能达到的200万次。
样品的处理 扫描电镜一次可以分析大量的样品 用透射电镜一次只能分析少量的样品。
图像形成 收集电子束与金属涂层试样相互作用产生的二次或背散射电子,并在计算机屏幕上显示产生的图像。 透射电子击中荧光屏产生标本的“阴影图像”,其不同部分根据其密度在不同的黑暗中显示。图像可以由操作员直接研究,也可以用相机拍摄。
三维图片 扫描电镜提供三维图像 透射电镜提供了二维图像。
当前的应用程序 研究标本的形貌和原子组成,过程控制,以及例如免疫标记的表面分布 成像细胞内部(薄片),蛋白质分子的结构(通过金属阴影对比),病毒和细胞骨架丝中的分子组织(通过阴性染色技术制备),以及细胞膜中蛋白质分子的排列(通过冷冻断裂)。

引用:
如需更多信息,请阅读/访问:

  1. 微生物学:原理与探索,第9版;杰奎琳·g·布莱克,劳拉·j·布莱克
  2. https://www.umassmed.edu/cemf/whatisem/
  3. https://www.va.gov/DIAGNOSTICEM/What_Is_Electron_Microscopy_and_How_Does_It_Work.asp
  4. https://www.nobelprize.org/educational/physics/microscopes/tem/

Acharya Tankeshwar

您好,感谢您访问我的博客。我是Tankeshwar Acharya。写博客是我的爱好。作为助理教授,我在尼泊尔的PAHS教授医学和护理专业的学生微生物学和免疫学。澳门金博宝188官方网站我在帕坦医院做了10多年的微生物学家。

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