罗伯逊熟肉(RCM)培养基用于培养好氧，微嗜氧和厌氧微生物，特别是梭状芽胞杆菌物种。它也被称为熟肉汤(CMB)，因为它含有无脂肪的牛心肉末和营养肉汤。它支持芽孢形成和非芽孢形成专性厌氧菌的生长，并区分腐菌和糖化菌。
葡萄糖、巯基乙酸酯、熟肉块、半胱氨酸、抗坏血酸等多种物质可以还原培养基中的氧。
巯乙酸肉汤含有营养肉汤，1%硫代乙酸酯也用于培养厌氧菌。
原则
接种前，将RCM/CMB培养基煮沸，使其无氧。接种后覆盖一层无菌液体石蜡油，防止氧气进入介质。培养基的成分有助于维持厌氧(还原)环境。
- 肉类中的不饱和脂肪酸利用氧气进行自氧化。这个反应是由肉中的血素催化的。
- 肉中的谷胱甘肽和半胱氨酸(都是还原剂)也会利用氧气。
- 巯基化合物(存在于半胱氨酸中)也有助于降低氧化还原电位。
(*欲了解各成分的详细说明及其意义，请参阅下面各成分的组成及作用)
作文
每升去离子水成分:*
| 熟肉中 | 250.0通用 |
| 动物组织消化 | 17.5通用 |
| 葡萄糖 | 5.0通用 |
| 氯化钠 | 5.0通用 |
| 酵母提取物 | 5.0通用 |
| 铁屑 | 10.0通用 |
| 氯高铁血红素 | 10.0毫升 |
| 维生素K | 10.0毫升 |
最终pH 6.8 +/- 0.3在25ºC。
*根据需要调整和/或补充，以满足绩效标准
熟肉适中:肉类颗粒作为一种还原和解毒物质，从而使复制有机体可能产生的有害副产品失效。由于变性蛋白中含有更多的还原性物质，所以在使用这种介质之前，肉颗粒是煮熟的。
铁屑:减少物质。铁屑和肌肉组织允许严格厌氧菌的生长。
营养补充剂:大多数细菌所需要的营养是由动物组织的消化性消化、酵母提取物和葡萄糖提供的。添加血红素和维生素K以促进厌氧微生物的生长。心脏组织颗粒中的肌肉蛋白也提供氨基酸和其他营养物质。
准备媒介的
- 罗伯逊的熟肉培养基最好从现成的脱水颗粒培养基，可从大多数供应商。
- 使用小管或勺子预先标记，以容纳1g颗粒，分配1克数量的培养基在螺旋盖瓶或管。
- 加入10毫升蒸馏水，混合，浸泡5分钟。
- 用高压灭菌法(打开盖子)在121温度下对介质进行消毒°C 15分钟。冷却后，拧紧瓶盖。标明介质的日期并给出批号。
- 将培养基储存在阴凉处，确保瓶盖拧紧。
保质期:2年，前提是介质的体积或外观没有变化表明受到污染。
介质pH值:室温下的pH值应在7.0-7.4范围内。
接种
根据标本的不同，用棉签、巴斯德移液管或铁丝环对熟肉培养基进行接种。如果使用棉签，应将其插入容器底部。
对于严格厌氧菌的培养，培养基最好是新鲜使用，或将其放在沸水容器中(打开瓶盖)10-15分钟以驱除任何溶解氧，或在80°C的水浴中浸泡30分钟以使其无氧。让培养基冷却至室温后再接种。CMB介质表面可覆盖一层无菌液体石蜡。
解释
糖溶解反应表现为肉变红，由于碳水化合物分解而产生腐臭气味。蛋白质水解反应表现为肉因蛋白质分解而发黑，散发出非常难闻的气味。
- perfringens梭状芽胞杆菌:糖溶性厌氧菌(将肉片的颜色变成红色)
- 有毒物质造成:梭状芽胞杆菌蛋白质水解性厌氧菌(肉变黑)
使用罗伯逊煮熟的肉类介质
- 尤指好氧、微嗜氧和厌氧微生物的培养梭状芽胞杆菌物种。它支持孢子形成和非孢子形成专性厌氧菌的生长。
- 它是有用的浓缩肉汤培养有机体从一个非常小的接种。
- 此外，研究人员还发现，熟肉培养基可以在很长一段时间内保存生物体的活力，并有助于维持厌氧储备生物体。
- 食品和药物管理局建议将其用于枚举和鉴定perfringens梭状芽胞杆菌从食物。
