硫代乙酸酯肉汤是诊断细菌学中最常用的浓缩肉汤。这种肉汤有助于生长厌氧生物、好氧菌、微嗜氧菌和挑剔的微生物。它含有许多营养因素，包括酪蛋白、酵母、牛肉提取物和维生素，以促进最重要的医学细菌的生长。其他营养补充包括;氧化还原指示剂(resazurin)、葡萄糖、维生素K1和血红素。
该培养基还含有0.075%的琼脂，以防止对流将大气中的氧气带到整个肉汤中。这种琼脂补充和还原剂硫乙醇酸的存在在管中创造了一个厌氧环境，允许厌氧细菌生长。
巯基乙酸酯肉汤中各种细菌的生长特性
一个。革兰氏阴性兼性厌氧杆菌(即那些可以在氧气存在或无氧情况下生长的细菌)通常在整个肉汤中产生弥漫性甚至生长。
B。革兰氏阳性球菌通常生长为离散的“蓬松球”。
C。严格的需氧细菌(即生长需要氧气)，如假单胞菌spp.，倾向于向肉汤表面生长，
D。严格的厌氧细菌(即那些不能在氧气存在下生长的细菌)生长在肉汤的底部。
硫代乙酸酯肉汤的用途
- 当怀疑厌氧菌感染时，建议使用巯基乙酸酯培养基从血液中分离出严格的厌氧菌。必须使用足够量的肉汤来防止血液凝结，并稀释血液中的天然杀菌物质。血液应至少用肉汤稀释1 / 10 (SPS，抗凝剂，对厌氧链球菌有抑制作用，所以不添加在硫代乙酸肉汤中)
- 硫代乙酸酯肉汤是根据各种细菌的需氧量来研究其生长特性的。
巯基乙酸汤的组成
每升去离子水成分:*
- 胰脏消化酪蛋白:15克
- 葡萄糖:5.5克
- 酵母提取物:5克
- 氯化钠:2.5克
- 巯基乙酸钠:0.5克
- l -胱氨酸:0.5克
- Resazurin: 1毫克
- 琼脂0.75克
最终pH值7.1 +/- 0.3在25°C．
原则
- 胱氨酸和酪蛋白:它们提供碳和氮化物，
- 葡萄糖:作为另一种能源添加
- 添加酵母提取物或豆粕的木瓜消化物作为生长促进剂。
- 氯化钠:维持渗透平衡。
- 巯乙酸钠:硫代巯基乙酸钠是一种还原剂，它通过从环境中去除分子氧来维持低氧张力，即，当它将分子氧还原为水时，它会产生厌氧条件。过氧化物对许多厌氧生物可能是致命的，但在这种条件下不会形成。
- Resazurin是一种氧化还原指示剂，氧化增加时呈粉红色，还原时无色。
- 琼脂:在硫代乙酸酯培养基中加入少量琼脂，通过阻碍氧气扩散到培养基中，有助于小接种菌和厌氧菌的起始和生长。它还阻碍了CO2和还原性物质从接种体周围的微环境中扩散。
某些添加剂可以根据需要加入到硫代乙酸酯介质中:
- Hemin被纳入供应未知因素为了刺激许多挑剔的生物生长，
- 维生素K是一些革兰氏阳性菌生长所必需的spore-formers而且拟杆菌物种。
- 添加碳酸钙芯片作为介质的缓冲，防止有毒酸的积聚。
巯基乙酸酯肉汤的制备与接种
巯基乙酸酯肉汤最好从现成的脱水粉末中制备，可从大多数培养基供应商处获得。
- 通常在每升蒸馏水中使用29.5g的介质(浓度可能因制造商而异)。
- 按照制造商的指示准备。将混合均匀的培养基以50毫升的量装在装有螺旋盖的瓶子中，螺旋盖有一个中心孔和橡胶衬里。用高压灭菌法(打开盖子)在121°C下消毒15分钟。
- 冷却后，拧紧瓶盖。在每个瓶盖上盖上箔盖或其他保护性覆盖物(先前浸泡在70% v/v乙醇中)。
- 给瓶子贴上标签。标明介质的日期并给出批号。储存在阴凉处。
保质期:最长可达2年，前提是介质的体积或外观没有发生氧化或污染的变化。
重要提示:如果在使用时，介质表面出现粉红色的窄带，这表明氧化，不应使用肉汤。将瓶子放入盛有沸水的容器中加热15分钟(打开瓶盖)，以驱除溶解氧。
接种
- 按照无菌技术接种培养基。
- 每瓶培养基都应附有书面接种说明。
- 一旦接种，肉汤应在35-35度孵育°C越快越好。
阅读的结果是巯基乙酸酯肉汤
A:用于从血液培养中分离细菌
每天(最多14天)检查可见的细菌生长迹象，如红细胞层上的浑浊，红细胞表面的菌落(棉球)，溶血，气泡和血块。记住，不仅厌氧菌，其他需要不同氧气的细菌也在硫代乙酸酯肉汤中生长。当有明显的细菌生长迹象，传代肉汤和检查甲苯胺蓝染色涂抹细菌。
B:为了寻找各种细菌的氧气需求
接种的试管孵育48小时后读取结果。当氧气在肉汤顶部扩散时，会形成一条粉红色的条带(记住:氧化还原指示剂瑞青嘌呤氧化时呈粉红色，还原时无色)．管的其余部分没有粉红色表明没有氧气和适合严格厌氧菌的环境。生物体在试管不同区域的生长将取决于这些生物体的需氧量特征:
- 严格的需氧菌只生长在粉红色的带，
- 微嗜氧菌会生长在氧气浓度较低的带底附近。
- 兼性厌氧菌和耐氧厌氧菌都会在整个管中生长。兼性厌氧菌，生长在整个培养基中，但大部分在底部兼性需氧菌生长在整个培养基中，但更多在顶部。兼性分子在氧存在的地方生长得最密集。
- 耐空气性在整个管中生长得同样好。通常，该测试应在48小时左右读取，尽管一些生长较慢的微生物可能需要更多的孵化时间。
参考文献和进一步阅读:
- 蒂勒，P. M. &福布斯，B. A.(2014)。贝利和斯科特的诊断微生物学(第十三版)。密苏里州圣路易斯:爱思唯尔。
- Cheesbrough M.(2007)。热带国家地区实验室实践，第2部分。剑桥大学出版社。
