醋酸盐利用试验:原理，程序，用途

醋酸盐利用试验用于确定生物是否可以使用醋酸盐作为碳的唯一来源。用含有醋酸钠作为唯一碳源和无机铵盐作为唯一氮源的醋酸琼脂接种生物体。生长表明醋酸盐利用试验呈阳性。

当细菌代谢乙酸盐时，铵盐被分解成氨，增加了培养基的pH值。pH值的增加使培养基中的溴百里酚蓝指示物从绿色变成蓝色。

测试生物

在鉴别时建议进行醋酸盐利用试验志贺氏杆菌种虫害的大肠杆菌。测试分离株是非乳糖发酵，革兰氏阴性杆，氧化酶阴性，非运动性，厌氧性，可能是其中之一大肠杆菌或志贺氏杆菌．

所需的材料

1. 醋酸钠琼脂倾斜
2. 无菌接种环
3. 无菌吸管
4. 无菌生理盐水

质量控制

大量新介质在使用前要进行质量控制。在储存和使用前检查介质是否有污染、裂纹、脱水和气泡的迹象。丢弃所有蓝色的管子。执行测试生物的性能测试:

• 大肠杆菌ATCC 25922 -乙酸酯阳性(生长;蓝色的颜色)
• 弗氏志贺菌ATCC 12022 -乙酸酯阴性(无生长或生长痕迹)

醋酸盐利用试验程序

1. 用直的接种针，用从分离良好的菌落中心挑选的分离菌轻轻倾斜接种醋酸盐。不要从肉汤培养接种，因为生长将过于沉重，有机会携带培养基。
2. 将盖松地放在管上。
3. 35℃有氧孵育^oC最多5天
4. 观察沿着斜面从绿色到蓝色的颜色变化。

注:

1. 生长在斜面上而没有伴随的颜色变化可能表明阳性测试。然而，如果琼脂在进一步培养时没有变蓝，则应减少接种量重复试验。
2. 为了避免假阳性反应，使用轻质接种物以防止先前培养基中的物质携带。
3. 不要刺斜，因为测试需要有氧环境。

预期结果:

重复测试，结果不明确。

1. 阳性测试:生物体的生长和测试介质的颜色从绿色到强烈的蓝色沿倾斜的变化。大多数(≈85%)大肠杆菌菌株对醋酸酯的利用呈阳性;大多数志贺氏杆菌生物(一些种类的美国flexneri)是消极的。
2. 负面:没有生长，没有颜色变化(即，斜面保持绿色)。

参考文献和进一步阅读

• 贝利和斯科特的诊断微生物学，福布斯，第11版
• 安德里亚·j·林斯科特，2016年。临床微生物学程序手册，第四版。ASM出版社，华盛顿特区。doi: 10.1128 / 9781683670438。