Bactec全自动血液培养系统

自动化血液培养系统是检测血液标本中病原体的主要选择。现在，实验室使用连续监测的自动化血液培养系统来处理血液培养标本，而不是手动读取基于肉汤的传统方法。这些系统增加了血液培养的产量，减少了生物体恢复的时间，并减少了实验室技术人员的动手时间。

市面上有几种自动化血液培养系统。一些最流行的连续监测血液培养系统有:

1. BACTEC (Becton Dickinson and Company)，
2. BacT/ALERT (bioMérieux)，以及
3. VersaTREK (Thermo Scientific)

BD BACTEC™全自动血液培养系统利用荧光技术检测血液培养瓶中的生物生长。

待测样品接种到一个或多个小瓶中，插入BD Bactec荧光系列仪器中孵育并定期读数。每个小瓶都装有一个化学传感器，可以检测微生物生长产生的二氧化碳(CO₂)的增加。

该仪器每十分钟监测传感器的荧光增加，这与存在的CO₂量成正比。阳性读数表明瓶中可能存在活的微生物。

Bactec血液培养瓶的组成

所有BACTEC培养瓶都含有大豆-酪蛋白消化肉汤，酵母，氨基酸，糖，维生素和聚氨基乙磺酸钠。树脂瓶包含非离子吸附树脂和阳离子交换树脂。聚乙醇磺酸钠(液体)是一种抗凝血剂，可防止细菌被固有的细胞和体液因子杀死。树脂中和了血液中抗生素的作用，增加了病原体恢复的机会。

BACTEC™Plus有氧/F培养瓶的组成如下:

配料表	BD BACTEC™Plus有氧/F
处理过的水	30 mL w/v
大豆-酪蛋白消化汤	3.0%
酵母提取物	0.25%
氨基酸	0.05%
糖	0.2%
维生素	0.025%
聚乙磺酸钠(SPS)	0.05%
抗氧化剂/还原剂	0.005%
非离子吸附树脂	13.4%
阳离子交换树脂	0.9%

Bactec血液培养瓶的类型

根据可疑病原体的类型，几种肉汤配方是可用的，包括用于恢复好氧和厌氧细菌、分枝杆菌和真菌的介质。没有一种微生物是最适合所有微生物的。BACTEC Plus有氧/F, Plus厌氧/F和Peds Plus/F瓶含有树脂。

介质名称	使用
BD BACTEC™Plus有氧介质	能支持好氧兼性生物生长的万能培养基。
BD BACTEC™Plus厌氧介质	普通专性厌氧和兼性生物的万能培养基。
BD BACTEC™Peds Plus介质	适应小体积和最佳检测常见的儿科和非儿科微生物
BD BACTEC™裂解厌氧介质	增加厌氧菌的检测和回收率。含有溶解红细胞和白细胞的洗涤剂。
BD BACTEC™标准有氧介质	从血液中提取细菌和酵母菌。
BD BACTEC™标准厌氧介质	从血液中回收厌氧生物。

血流感染的实验室诊断要点

1. 抽血培养开始抗菌治疗前
2. 采血量:由于每毫升血液的细菌数量通常较低，所以合理的采血量很重要:成人每次静脉穿刺20毫升，儿童/婴儿2-5毫升，婴儿和新生儿1-2毫升。
3. 使用2-3瓶成人血培养装置，至少一个有氧和一个无氧;儿童使用1-2瓶有氧瓶。
4. 采血时间:在使用抗生素前，应尽可能抽血。最好的时间是当病人预计有寒战或体温飙升的时候。建议两次或最好是三次血培养，间隔约1小时。
   注:培养血液的总容量比培养时间对提高机体产量更为关键。
5. 消毒静脉穿刺部位用2%碘酊，10%聚维酮碘，70%酒精，或0.5%洗必泰在70%酒精洗必泰中。(洗必泰不建议用于2个月以下的儿童)。
6. 导管抽血培养有较高的污染风险(假阳性)。
7. 抗凝血剂的使用:如果血液没有加入足够量的肉汤(立即)，建议使用抗凝血剂，如聚乙醇磺酸钠(SPS)。SPS还抑制血清和吞噬细胞的抗菌作用。如果立即将血液加入足够量(50毫升)的肉汤中，并充分混合以防止凝血，则不需要抗凝剂。
8. 不提交导管培养提示没有陪伴血培养通过静脉穿刺获得的。
9. 孵育前绝不冷藏血液。
10. 在以下情况下，怀疑是真正的血液感染:
    1. 如果相同的生物体在两瓶相同的血液标本中生长;
    2. 如果同一生物从一个以上的标本中培养出来;
    3. 如果生长迅速(48小时内);
    4. 如果一个物种的不同分离物显示相同的生物型和抗菌药敏感性谱。

菌血症和真菌血症的最常见原因是在这一环节中发现的

过程

1. 从BD BACTEC药瓶顶部取下翻转盖，检查药瓶是否有裂缝、污染、介质中过多的浑浊和鼓胀或凹陷的隔膜。如果发现任何缺陷，请勿使用。
2. 接种前，用酒精擦洗鼻中隔(不建议使用碘酒)。
3. 每瓶直接无菌注射或抽取样品8 - 10ml。如果样本量减少，回收率将不如较大的样本量(详见血培养:适应症、时间和容量）
4. 尽快将接种的小瓶置于BD BACTEC荧光系列仪器中进行孵育和监测。
5. 在测试协议期间，输入仪器的小瓶将每十分钟自动测试一次。阳性小瓶将由BD BACTEC荧光系列仪器确定并识别(参见相应的BD BACTEC荧光系列仪器用户手册)。
6. 取出阳性小瓶，在适当的固体培养基中传代培养(巧克力琼脂，血琼脂,而且MacConeky琼脂)和革兰氏染色。革兰氏染色将提供必要的初步报告，可以帮助医生在等待培养报告时做出适当的决定。
7. 如果在固体培养基中观察到生长，请注意菌落形态、进行必要的测试以识别隔离，并执行抗菌药敏试验．

BD Bactec全自动血液培养系统工作原理

当微生物存在于接种到BD BACTEC小瓶的测试样品中时，它们会代谢培养基中的营养物质，向培养基中释放CO₂。培养瓶底部传感器中的染料会与CO₂发生反应。这可以调节传感器中荧光材料吸收的光量。该仪器的光电探测器测量荧光水平，对应于生物释放的CO₂量。

对CO₂增加的速率和数量的分析使BD BACTEC荧光系列仪器能够确定小瓶是否为阳性，即测试样品中含有活的生物体。

参考资料及进一步阅读

• BD BACTEC血液培养系统