丁酸圆盘试验是一种快速检测酶的方法丁酸酯酶。当与血琼脂板上的特征形态、典型的革兰氏染色和氧化酶阳性试验结合使用时，丁酸试验有助于明确识别莫拉克斯氏菌属复活。
丁酸盐测试概述
| 方法 | 丁酸圆盘试验(卡他氏试验) |
| 检测 | 丁酸酯酶 |
| 使用 | 的识别莫拉克斯氏菌属复活 |
| 所需的时间 | 5 - 7分钟 |
| 预期的结果 | 蓝色的发展 |
| 限制 | 如果孵育时间超过5分钟，反应为假阳性。 |
原则
将疑似细菌菌落应用于溴氯吲哚丁酸(丁酸酯酶底物)浸渍的滤纸圆盘上，并检查是否存在蓝色。
水解的bromo-chloro-indolyl丁酸盐浸渍在圆盘上的丁酸酯酶释放出来吲哚酚．在氧气存在的情况下，吲哚基自发形成靛蓝，一种显色化合物，呈现蓝色到蓝紫色。如果滤纸圆盘呈蓝色，则该生物被识别为复活的．如果圆盘是无色的(白色)，丁酸酯酶反应记录为阴性。
4-甲基伞形基丁酸酯(MUB)也可用作底物。MUB水解产生一种在紫外光下可见的荧光化合物。
测试生物
革兰氏阴性，氧化酶阳性双球菌在生长血琼脂当用一圈或金属丝提起时，白色的菌落仍然在一起。
质量控制:
- 如果磁盘不是白色且没有可见颜色，请丢弃磁盘。
- 在使用磁碟或MUB试剂之前，对每个新批次和装运的磁碟或MUB试剂进行质量控制。
- 生物:
- 莫拉克斯氏菌属复活ATCC 25240:丁酸盐阳性
- 淋病奈瑟氏菌ATCC 43069:丁酸盐阴性
使用
- 丁酸盘试验有助于鉴别莫拉克斯氏菌属复活。
- 丁酸盐圆盘试验有助于鉴别淋病奈瑟氏菌(负面)莫拉克斯氏菌属复活(阳性)，均为氧化酶阳性，革兰氏阴性双球菌。
丁酸盐圆盘试验程序
- 从小瓶中取出一个圆盘，放在玻璃显微镜载玻片上
- 加入1滴试剂级水。这应该会在圆盘上留下少量多余的水。
- 使用木棒，从18到24小时的纯培养物中取少量氧化酶阳性革兰氏阴性双球菌菌落擦到圆盘上。
- 在室温下孵育5分钟。
预期结果:
- 阳性:在5分钟的孵育时间内出现蓝色或荧光(如果MUB用作底物)。
- 阴性:没有颜色变化
限制
- 如果潜伏期超过5分钟，可见假阳性反应。
- 如果接种量太小，可能会发生假阴性反应。如果可疑的微生物给出阴性的测试结果，重复更大的接种量，并后续使用其他方法。
参考文献和进一步阅读
- 临床微生物程序手册，第四版。(2016)。美国微生物学会。https://doi.org/10.1128/9781555818814
- Michael A Noble, Bailey和Scott的诊断微生物学，第十四版(2017)。贝蒂·福布斯，丹尼尔·f·萨姆，爱丽丝·s·维斯菲尔德。密苏里州圣路易斯:莫斯比。