EMB琼脂:组成，原理和菌落形态-微生物在线

伊红亚甲基蓝(EMB)琼脂是一种选择性和差异化培养基。它选择性地促进革兰氏阴性菌的生长，并有助于乳糖发酵菌落和非乳糖发酵菌落的分化。

EMB琼脂用于分离粪便大肠菌群。EMB琼脂可用于分离或用于膜过滤技术。用EMB琼脂接种大肠杆菌显示生长有绿色金属光泽菌落。

由Holt-Harris和Teague首先描述的EMB琼脂含有乳糖和蔗糖作为碳水化合物的来源。Levine通过添加蛋白胨和磷酸盐对培养基进行了修改，从配方中去除蔗糖，并增加乳糖含量。这有助于区分粪便和非粪便类型的大肠菌群。它还将沙门氏菌和其他非乳糖发酵剂与大肠菌群区分开来。

另一种常用的培养基选择性分离革兰氏阴性杆和分化的成员输入obacteriaceae分为乳糖发酵罐和非乳糖发酵罐MacConkey琼脂．

原则

伊红美蓝琼脂含有蔗糖和乳糖，被用作可发酵的碳水化合物底物，促进一些革兰氏阴性细菌的生长，特别是粪便和非粪便大肠菌群。肠内细菌的分化是可能的，因为在EMB琼脂中存在乳糖和蔗糖，以及某些细菌在培养基中发酵乳糖的能力。

Lactose-fermenting革兰氏阴性菌使培养基酸化，从而降低pH值，染料产生一种深紫色复合物，常伴有绿色金属光泽。这种金属绿色光泽表明旺盛的乳糖和/或蔗糖发酵能力典型的粪便大肠菌群。
生物体慢lactose-fermenters产生较少的酸，和E菌落呈棕粉色。
Non-lactose发酵通过蛋白质脱氨来增加培养基的pH值无色或淡粉色菌落。

伊红Y和亚甲基蓝是pH指示物在低pH值下结合形成深紫色沉淀物的染料;它们还能抑制大多数革兰氏阳性菌的生长。动物组织的消化酶是碳、氮和其他生长必需营养素的来源。磷酸盐缓冲介质。

EMB琼脂和改良EMB琼脂(Levine EMB)的成分略有不同。Levine修饰含有10g乳糖(EMB琼脂的两倍)，不含蔗糖。

pH值:7.1±0.2在25°C。

生物	EMB琼脂上的集落外观
大肠杆菌	菌落直径为2-3毫米，具有金属光泽反射光中的绿色金属光泽在透射光中，中心呈暗甚至黑色。
肠杆菌属aerogenes	菌落直径4-6mm，隆起，呈粘液状，易于汇合。无金属光泽，灰褐色中心透射光
沙门氏菌而且志贺氏杆菌spp	半透明无色菌落
假单胞菌spp	无色不规则菌落
变形杆菌spp	无色的殖民地
革兰氏阳性球菌	部分抑制生长或无生长
Coagulase-positive葡萄球菌	改良EMB上的无色“针尖”菌落

无菌测试可通过从每批中取出3-5%未接种的培养皿在37℃下孵育18-24小时进行。培养基中的任何生长都应被视为污染，整个批次应被丢弃。

制备的EMB琼脂板的性能测试可以通过将已知菌株接种到培养基中，观察其生长和菌落特征来完成。

生物	生长和菌落特征
大肠杆菌写明ATCC 25922	良好的增长,带有绿色金属光泽的蓝黑色菌落
沙门氏菌choleraesuis无性系种群。霍乱杆菌血清型鼠伤寒ATCC 14028	繁茂生长，无色到琥珀色的殖民地
粪肠球菌写明ATCC 29212	抑制(部分)
弗氏志贺菌写明ATCC 12022	中度至重度生长，无色至琥珀色菌落

乳糖发酵肠杆菌与非乳糖发酵肠杆菌的分离与鉴别。

EMB琼脂用于水质检测为了区分大肠菌群和粪便大肠菌群，表明可能的致病微生物污染的水样(存在大肠杆菌在水样中显示了粪便污染水源的可能性，其他致病性肠道细菌的存在也是如此)．
EMB媒体协助视觉的区别的大肠杆菌,其他非致病性乳糖发酵肠道革兰氏阴性菌，以及沙门氏菌和志贺氏菌属。大肠杆菌菌落生长时带有金属光泽，中心为黑色。产氧细菌菌落中心为棕色，非乳糖发酵革兰氏阴性菌为粉红色。
EMB琼脂也用于区分结肠伤寒痢疾类群中的生物。对于沙门氏菌和志贺氏菌的培养，通常选用麦康基琼脂和EMB琼脂等选择性培养基。
Levine EMB琼脂可用于分离和鉴定白色念珠菌来自临床标本。在蒸压后加入0.1g/L盐酸金四环素，抑制伴随菌群，使培养基具有选择性。培养基是蓝色的。殖民地的白色念珠菌在35°C 10%的二氧化碳中孵卵24至48小时后出现“蜘蛛状”或“羽毛状”。其他假丝酵母物种产生光滑的酵母样菌落。

参考文献和进一步阅读

ASMscience |伊红-亚甲基蓝琼脂板方案．检索于2020年6月12日，来自https://www.asmscience.org/content/education/protocol/protocol.2869
欢迎来到微虫-伊红亚甲基蓝琼脂．检索于2020年6月12日，来自https://www.austincc.edu/microbugz/eosin_methylene_blue_agar.php
伊红亚甲基蓝琼脂(EMB)．(2016年4月12日)。生物学LibreTexts。