周期性酸-希夫(PAS)染色技术是一种显示碳水化合物和真菌细胞壁成分的染色技术。PAS可以检测组织中糖原、多糖和粘蛋白的存在，无论是福尔马林固定、石蜡包埋或冷冻组织切片。PAS在实验室进行组织学研究。
周期性酸性希夫(PAS)染色原理
染料的周期酸在氧化过程中与碳水化合物反应。在此过程中，多糖与周期性酸反应形成氧化化合物-醛。现在，醛和希夫试剂反应，得到紫红色。同样，粉红色的外观表明存在细胞内或细胞外粘蛋白。相反，使用苏木精或甲基绿作为反染色剂有助于染色细胞核。同样，浅绿色的反染剂是更好的显示真菌有机体。
溶液和试剂
0.5%周期酸溶液
- 周期性酸结晶-0.5 g
- 蒸馏水100毫升
将0.5 g周期酸晶体混合在100毫升蒸馏水中制备0.5%周期酸溶液。
品红试剂
5克碱性品红溶于900毫升开水中。冷却至50°C后，向混合物中加入100毫升1M HCl。再加10g K2年代2O5一旦混合物冷却到25°C。完全混合后，摇3分钟，在暗室中孵育24小时。
孵育后，在混合物中加入5克活性炭。然后摇3分钟，过滤。如果溶液不是晶莹剔透的，就必须对溶液进行再过滤和再处理。将溶液保存在4°C的锡纸盖瓶中。如果储存得当，适合使用2-3周。
用于检测制备的希夫试剂的纯度:
向烧杯中倒入10毫升10%的福尔马林，然后加入几滴准备好的希夫试剂。那么颜色的变化被解释为
- 红紫色表示它是一种很好的希夫试剂。
- 深蓝紫色表示希夫试剂差(反应延迟)。
迈耶的苏木精
- 硫酸铝钾(明矾)- 50克
- 蒸馏水- 1000毫升
- 苏木精- 1克
- 碘酸钠- 0.2克
- 冰醋酸- 20毫升
将明矾溶解在蒸馏水中。待明矾完全溶解后加入苏木精。待苏木精完全溶解后，加入碘酸钠和乙酸。然后煮沸并冷却。
定期酸-希夫(PAS)染色程序
- 首先用蒸馏水清洗组织切片，去除石蜡。
- 然后，将组织置于0.5%的周期性酸性溶液中5分钟。它氧化组织。
- 之后，用蒸馏水适当冲洗组织。
- 然后，用希夫试剂覆盖5-15分钟，变成浅粉色。
- 之后，用温水清洗污渍5分钟，它会变成深粉色。
- 然后用梅耶尔苏木精反染色1分钟。
- 之后，用自来水冲洗5分钟，然后用蒸馏水冲洗。
- 最后，将载玻片脱水，放置盖玻片并使用合成安装介质安装。
周期性酸-希夫(PAS)染色结果解释
- 糖原，黏蛋白和一些基底膜-红/紫
- Fungi-Red /紫色
- Background-Blue
周期性酸-希夫(PAS)染色的应用
- 周期性酸-希夫(PAS)染色用于检测肝脏中的糖原沉积。这个测试是有用的，当一个人怀疑糖原储存疾病。
糖原储存病(GSD)是一种遗传性疾病，患者身体不能产生酶将复杂的糖原分解成更简单的形式。它会影响身体的不同部位，如肝脏、肌肉等。
- 它显示了膀胱、肾脏、卵巢、胰腺和肺肿瘤中的糖原颗粒。
- 它被用来观察存在于身体各个组织中的基底膜。同样，PAS显示肾小球基底膜的厚度，用于检测肾组织异常。
- PAS染色用于腺癌(腺癌)的诊断。
- 不确定白色念珠菌，来自烟曲霉属真菌,新型隐球菌组织样本中的感染。
- PAS染色可检测胃肠道中性黏蛋白和部分上皮黏蛋白。
- PAS可用于研究肺泡蛋白沉积症的无定形或颗粒状小球。
肺泡蛋白沉积症是一种罕见的疾病，它会导致肺部的气囊被表面活性剂堵塞。
- PAS用于研究皮肤的嗜酸性球状体或卡米诺体。
参考文献
- (IHC World, 2011)。(2011)。PAS(周期性酸性希夫)染色方案。包含IHC世界．http://www.ihcworld.com/_protocols/special_stains/pas.htm
- 染色，定期酸性希夫试验-试验结果，正常范围，成本和更多．Lybrate。(2022)。检索2022年6月21日，从https://www.lybrate.com/lab-test/stain-periodic-acid-schiff．
- (2022)。检索2022年6月21日，从https://www.labce.com/spg949466_periodic_acid_schiff_pas_diagnostic_applications.aspx．