过氧化氢酶是一种由生活在含氧环境中的微生物产生的酶，用于中和有毒形式的氧代谢物如过氧化氢(H2O2)．过氧化氢酶保护需氧生物和兼性厌氧生物免受氧化损伤。厌氧菌一般缺乏过氧化氢酶。过氧化氢酶也是一种重要的葡萄球菌毒力因子。
原则
2 h2O2→2 h2O +O2(气泡)
过氧化氢酶介导过氧化氢(H2O2)转化为氧气和水。为了发现一种特定的细菌分离物是否能产生过氧化氢酶，将少量的细菌分离物接种到过氧化氢溶液中(3%)。观察到氧泡的快速细化。缺乏过氧化氢酶可以通过缺乏或微弱的气泡产生来证明。
过氧化氢酶阳性细菌包括严格的需氧生物和兼性厌氧生物．它们都能用氧气作为末端电子受体进行呼吸。
过氧化氢酶阴性细菌可能是厌氧菌或兼性厌氧菌，只发酵，不使用氧气作为末端电子受体呼吸(即链球菌)。
H百分比2O2用于过氧化氢酶试验
| 百分比 | 目的 |
| 3% H2O2 | 需氧菌的例行测试 |
| 15% H2O2 | 厌氧菌鉴定。 |
| 30% H2O2 | 在超氧过氧化氢酶中(用于特定物种形成的假定奈瑟氏菌属sps) |
过程
滑测试
- 将少量菌落转移到干净、干燥的载玻片表面Op或无菌木棍(确保在幻灯片上肉眼可见菌落)。
- 下落3% H2O2放到滑梯上搅拌。
- 积极的结果是氧气的快速进化(在5-10秒内)，如气泡所示。
- 阴性结果是没有气泡或只有一些分散的气泡
- 在生物危害玻璃处理容器中处理你的幻灯片。
试管过氧化氢酶试验
- 加入4到5滴3%的氢2O2一个试管
- 使用木棒，从分离良好的18 - 24小时菌落中收集少量生物，并将其放入试管中(注意:注意不要捡起任何琼脂(特别是使用血琼脂时)。
- 将试管放置在深色背景下，观察木棒末端是否立即形成气泡(O2 +水=气泡)。
结果
- 过氧化氢酶阳性反应:立即可见泡腾(泡沫的形成)
- 过氧化氢酶阴性反应:无(起泡)气泡20秒后形成或少量气泡。
过氧化氢酶阳性生物:葡萄球菌、Micrococci芽孢杆菌物种,痤疮丙酸杆菌，幽门螺杆菌，流感嗜血杆菌，莫拉菌物种,奈瑟氏菌属物种巴斯德菌,物种,布鲁氏菌物种
过氧化氢酶阴性生物:链球菌(例如:无乳链球菌，肺炎链球菌，化脓链球菌)，肠球菌物种,梭状芽胞杆菌物种(例如，产气荚膜梭菌，败血症梭菌，tertium梭菌)，杜氏嗜血杆菌，锈蚀氏嗜血杆菌，金氏嗜血杆菌种
你可以在线执行过氧化氢酶测试
*注意:有些细菌含有过氧化氢酶以外的酶，可以分解过氧化氢，20-30秒后形成的几个小气泡不被认为是阳性测试。
质量控制
每批或每批试剂在使用前都应进行阳性和阴性对照试验。
一个。金黄色葡萄球菌ATCC 25923-过氧化氢酶阳性
B。链球菌化脓性植物ATCC 19615-过氧化氢酶阴性
金黄色葡萄球菌分泌过氧化氢酶和超氧化物歧化酶，抑制吞噬细胞的髓过氧化物酶系统对机体的破坏。
预防措施/限制
- 罕见的葡萄球菌菌株可能是过氧化氢酶阴性，和一些肠球菌产生“假过氧化氢酶”和弱阳性H2O2．
- 不要使用金属环或针与H2O2；它会给出假阳性并降解金属。相反，使用一个白金环或木棍来进行这个测试。
- 如果使用菌落血琼脂平板，小心不要刮到任何血琼脂，因为红细胞是过氧化氢酶阳性。任何污染琼脂的存在(红细胞的残留)都可能产生假阳性。
- 过氧化氢酶存在于活菌中;不要测试超过24小时的菌落。旧的培养可能会给出假阴性结果。
- 不要从Mueller-Hinton琼脂。
使用
- 过氧化氢酶试验主要用于区分革兰氏阳性球菌:属的成员葡萄球菌是catalase-positive属的成员链球菌而且肠球菌catalase-negative。
- 过氧化氢酶试验用于鉴别耐氧菌株梭状芽胞杆菌(catalase-negative)芽孢杆菌物种(catalase-positive)。
- 半定量过氧化氢酶试验用于鉴定结核分枝杆菌。
- 过氧化氢酶试验有助于分离挑剔的革兰氏阴性菌。
- 过氧化氢酶试验可作为鉴别的辅助手段肠杆菌科．委员会成员肠杆菌科家人都过氧化氢酶阳性。
- 痢疾类型1、3、4、6、9、11、12和鲍氏血清12型为过氧化氢酶阴性，而其他种类的志贺氏杆菌,EIEC和STECcatalase-positive。
- 淋病奈瑟氏菌由于超氧醇的存在，气泡的精化程度得到了增强。
参考文献和进一步阅读
- 蒂勒，P.(2017)。贝利和斯科特的诊断微生物学(14版)。处于。
- 普罗科普，g.w.， &科尼曼，e.w.(2016)。科尼曼的彩色图集和诊断微生物学教科书(国际版第七版)。利平科特·威廉姆斯和威尔金斯。
- 凯伦Reiner。(2010)。过氧化氢酶试验方案．美国微生物学会
- 临床微生物程序手册，第四版。(2016)。美国微生物学会。https://doi.org/10.1128/9781555818814
- 过氧化氢酶、超氧化物歧化酶与金黄色葡萄球菌的毒力。体外和体内研究，重点是葡萄球菌-白细胞相互作用。《临床投资杂志》1975年3月;55(3):561-6。doi: 10.1172 / JCI107963。PMID: 1117067;PMCID: PMC301784。
