Sabouraud琼脂或Sabouraud Dextrose琼脂(SDA)选择性介质主要用于皮肤真菌的分离。其他真菌,酵母和丝状细菌,如诺卡氏菌属也可以在SDA中生长。这种培养基的酸性pH值(pH值约为5.0)抑制细菌的生长,但允许酵母和大多数丝状真菌的生长。还可以添加抗菌剂以增强抗菌效果。
这种介质也用于确定食品的真菌学评价,化妆品中的污染,并在临床上帮助诊断酵母菌和真菌感染。
像氯霉素、庆大霉素和四环素这样的抗生素可以作为选择性剂添加,以抑制竞争细菌的过度生长,同时允许真菌和酵母的成功分离。根据预期用途,还报道了使用环己亚胺、青霉素、链霉素、新霉素等各种其他修饰。
原则
Sabouraud葡萄糖琼脂是由酪蛋白的酶消化以及为真菌和酵母的生长提供氨基酸和氮化合物的营养来源的动物组织。
葡萄糖是一种可发酵的碳水化合物,作为碳和能量来源被高浓度地吸收。琼脂是固化剂。加上抗生素比如氯霉素和/或四环素作为广谱抗菌剂,抑制各种革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的生长。庆大霉素的加入是为了进一步抑制革兰氏阴性菌的生长。
SDA的组成
成分 | 通用汽车/ L |
真菌学蛋白胨(酪蛋白和动物组织的酶消化) | 10通用 |
葡萄糖 | 40通用 |
琼脂 | 15通用 |
SDA的编制
- 将65克培养基悬浮在一升纯净水中。
- 加热,经常搅拌,煮沸一分钟,使介质完全溶解。
- 121°C高压灭菌15分钟。
- 冷却至45至50°C,倒入培养皿或试管中倾斜。
- 处理标本时,将标本划到无菌培养基上接种环获得孤立的殖民地。
- 在25 - 30°C的倒置位置(琼脂面朝上),增加湿度孵育。
- 培养物应每周检查真菌生长情况,并保持4 - 6周后报告为阴性。
结果及解释:
经过充分的培养,SDA板在条状区域表现出孤立的菌落,在大量接种区域表现出融合生长。检查板上的真菌菌落是否有典型的颜色和形态。应进行额外的检查以确认检查结果。
酵母会生长成乳白色的菌落。霉菌会长成各种颜色的丝状菌落。
SDA上某些真菌典型的菌落形态
真菌 | 菌落形态 |
黄曲霉 | 黄绿色,粉状,背面淡黄色 |
黑曲霉 | 最初的生长是白色的,后来变成黑色,形成“盐和胡椒的外观”,这是由于分生孢子上大量产生的深色分生孢子,并反过来变成淡黄色 |
红酵母属物种 | 粉红色-橙色奶油殖民地 |
来自烟曲霉属真菌 | 背面为蓝绿色、粉状和淡黄色。 |
曲霉属真菌nidulans | 带白色边缘的蓝绿色,背面带黄色到棕色 |
毛孢子菌属黏液状的 | 白色至奶油色,微黄,有褶皱 |
地丝菌属candidum | 白色到米色,扁平,具气生菌丝体 |
Sabouraud琼脂的改性
SabHI琼脂由Sabouraud葡萄糖琼脂和脑心灌注琼脂.SabHI琼脂比单独的任何一种培养基产生更大的病原真菌回收率。
限制Sabouraud琼脂
- 它不能促进丝状真菌的产孢。
- 添加到培养基中抑制细菌的抗菌剂也可能抑制某些致病真菌。
- 避免pH值为酸性的介质过热;这可能导致介质变软。
注:我很感谢Yuri允许我们使用他的照片。更多图片请访问http://thunderhouse4-yuri.blogspot.com/
参考文献和进一步阅读
- 陈志伟,陈志伟,陈志伟,等。(2022)琼脂和其他真菌生长培养基。见:Gupta v.k., Tuohy M.(编)真菌生物学实验室协议。真菌生物学。施普林格,可汗。https://doi.org/10.1007/978-3-030-83749-5_2