脱羧试验:类型，原理，用途

脱羧酶是一组底物特异性酶，能够与氨基酸的羧基(COOH)部分反应，形成碱性反应胺和副产物二氧化碳。培养基pH值的增加是通过pH指示物溴甲酚紫和甲酚红的颜色变化来检测的。

溴甲酚紫色在碱性pH值下变为紫色，在酸性pH值下变为黄色。

每种脱羧酶都是特定于一种氨基酸的。赖氨酸，鸟氨酸和精氨酸是三种氨基酸的常规测试鉴定肠杆菌科。

具体的胺类产物为:

1. 赖氨酸- 5 -戊二胺
2. Ornithine-Putrescine
3. 精氨酸-瓜氨酸

这些副产品足以提高pH值让汤汁沸腾紫色。所使用的培养基是精氨酸二水解酶肉汤，这是一种添加0.5%精氨酸的营养肉汤。

精氨酸水解为鸟氨酸(精氨酸首先通过二水解酶反应转化为瓜氨酸，其中精氨酸中的NH2基团被脱除。瓜氨酸接下来转化为鸟氨酸)。鸟氨酸经过脱羧形成腐胺。胺的产生，腐胺，pH值升高，pH值指示物溴甲酚紫让紫色颜色在介质中(碱性条件下)。

如果接种的培养基是黄色的，或者如果没有颜色变化，该生物体对该氨基酸的脱羧酶是阴性的。如果培养基变成紫色，则该生物对该氨基酸的脱羧酶呈阳性。

需求

1. Moeller脱羧酶碱基-4管与赖氨酸，鸟氨酸和盐酸农业氨酸1%对照

方法

1. 接种试验介质，覆盖无菌石蜡油(接种管必须避免接触空气，避免介质表面发生假碱化)
2. 每天培养和阅读四天

结果

• 紫色-正脱羧
• 黄色-阴性，即没有脱羧

控制

1. 赖氨酸:肺炎克雷伯菌
2. 鸟氨酸:肠杆菌属下水道
3. 精氨酸:肠杆菌属下水道

负

1. 赖氨酸:肠杆菌属下水道
2. 鸟氨酸:肺炎克雷伯菌
3. 精氨酸:克雷伯氏菌肺炎

脱羧试验的用途:

精氨酸脱羧酶检测:它有助于区分具有密切相关生理特征的肠道细菌。

赖氨酸脱羧酶试验(LDC):协助鉴定沙门菌(+ve)及志贺氏菌(-ve)。细菌赖氨酸脱羧酶(LDC)阳性有:

1. 大肠杆菌
2. 伤寒沙门氏菌和大多数其他沙门氏菌(除甲型副伤寒沙门氏菌)。
3. 肺炎克雷伯菌
4. 粘质沙雷氏菌
5. 霍乱弧菌
6. 弧菌Parahemolyticus