放射免疫分析法(RIA)非常敏感(可以在<0.01 μg/mL的浓度下进行检测),是一种用于抗原或半抗原定量检测的特定技术。
RIA是生物医学研究和临床实践中极其重要的工具。它通常用于测定血清中的微生物抗原、蛋白质、维生素、激素或药物。一种专门的RIA称为放射性过敏原吸附试验(RAST)用于测量与已知过敏原(抗原)反应的血清IgE抗体的量。
由于相关的无线电危险,RIA的使用减少了,并已在很大程度上被ELISA测试。
放射免疫分析法由Berson和Yalow(1960)发明,1977年获得诺贝尔奖。
RIA的原理与用于抗原检测的竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)相似,除了核苷酸(通常是核苷酸)除外125我或14C)在RIA中取代酶。
原则放射免疫分析法(RIA)
放射免疫分析法使用放射性同位素标记的纯化已知抗原与未标记(未知)抗原竞争已知数量抗体的结合位点。
抗原和抗体之间形成的Ag-Ab配合物可以用第二抗体沉淀,结合物的放射性量可以用放射性同位素分析仪和放射自显影法测量。
当样本中含有大量抗原时,抗体的大部分抗原结合位点被未标记的抗原占据。所以被束缚的配合物几乎没有放射性。事实上,产生的放射性与样本中抗原的含量成反比。
然后,样本中存在的未知(未标记的)抗原或半抗原的浓度通过绘制使用不同浓度的相同抗原生成的标准图中产生的放射性值与结合复合物的放射性值来确定。
广告vantages
- 灵敏度高,可用于检测少量的分析物或抗原。
- 抗原或分析物的定量是可能的RIA。
限制
- 放射性同位素的处理需要特殊的安全措施。由于这种局限性,在临床实验室中,RIA已被ELISA所取代。
参考文献和进一步阅读
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