脱氧胆酸柠檬酸琼脂(DCA)是一种选择性和差异化的培养基，特别推荐用于肠道病原体的分离沙门氏菌而且志贺氏杆菌物种。柠檬酸脱氧胆酸琼脂是由leifson公司对脱氧胆酸琼脂进行改性而成。由于柠檬酸盐和脱氧胆酸盐浓度的增加，DCA对肠道病原体具有选择性。脱氧胆酸钠在pH值7.3至7.5对革兰氏阳性菌有抑制作用。柠檬酸盐，在配方中所含的浓度，是抑制革兰氏阳性细菌和大多数其他正常菌群存在
DCA最好从现成的脱水粉末中制备，可从大多数培养基供应商处获得。
柠檬酸脱氧胆酸琼脂(DCA)的组成
| 成分 | 通用汽车/升 |
| 蛋白胨 | 5．0 |
| Lab-Lemco粉 | 5．0 |
| 乳糖 | 10．0 |
| 柠檬酸钠 | 8.5 |
| 硫代硫酸钠 | 5.4 |
| 柠檬酸铁铵 | 1．0 |
| 钠脱氧胆酸盐 | 5．0 |
| 中性红 | 0.02 |
| 琼脂 | 12.0 |
| pH 7.3±0.2 @ 25°C |
蛋白胨提供碳，氮，维生素和矿物质。
Lab-Lemco是一种肉类提取物，由特殊选择的原料，调整到中性，并干燥成细粉。它将促进许多细菌的生长，它被广泛纳入培养基作为坚实的基础材料，因为它促进许多细菌的生长。
磷酸钾缓冲介质。
乳糖有助于区分肠杆菌(乳糖发酵剂产生红色/粉红色菌落，而乳糖非发酵剂产生无色菌落殖民地)。乳糖的发酵引起酸化，pH值指示中性红色变成红色。乳糖发酵菌落周围可能有一个浑浊的沉淀带，这是由酸性环境中脱氧胆酸盐的沉淀引起的。
减少柠檬酸铁铵硫化铁的形成以黑色硫化铁的形成为标志。如果细菌产生H2S，菌落就会有黑色的中心。
大肠菌群和革兰氏阳性菌被抑制或大大抑制脱氧胆酸钠，柠檬酸钠，柠檬酸铁铵。
柠檬酸脱氧胆酸琼脂(DCA)的制备
按照制造商的指示准备介质。
- 将52克脱水介质(由制造商提供)悬浮在1升蒸馏水中。
- 小心加热，使介质完全溶解。不要煮沸或高压灭菌介质。避免过度或长时间加热。不要高压灭菌。(如果经过高压灭菌，琼脂变得柔软，几乎不可能有条纹)
- 一旦介质冷却到50°C -55°C，充分混合并无菌分配
佩特里 菜 - 将盘子标为“DCA”。标明介质的日期并给出批号。保存在2°C - 8°C，最好在密封的塑料袋，以防止水分流失。
储存条件和保质期
- 脱水介质保存在10-30°C，并在标签上的有效期前使用。
- 将制备好的琼脂板保存在2-8°C。保质期长达6周，前提是介质的外观没有变化，表明受到污染或pH值发生变化。
外观
- 脱水介质:稻草/粉红色，自由流动的粉末
- 制备介质:粉红色凝胶
接种所制备的培养基
- 使用前将琼脂表面擦干。
- 用粪便或直肠拭子大量接种培养基，将原始接种物的一部分展开，以便在平板的某一部分上获得分离良好的菌落。
- 35°C孵育18-24小时。
- 如果微生物是后期发育的，或者没有观察到非乳糖发酵剂，则再培养24小时。
柠檬酸脱氧胆酸琼脂(DCA)的菌落特征
沙门氏菌而且志贺氏杆菌沙门氏菌不发酵乳糖，但可以产生H2S，形成无色菌落，有或没有黑色中心。
常见肠道细菌在柠檬酸脱氧胆酸琼脂(DCA)上的菌落形态总结如下:
| 物种 | 菌落形态 |
| 大肠杆菌 | 大多数菌株被抑制，但少数菌株生长产生粉红色的脐带菌落，周围有一个沉淀物区。 |
| 志贺氏杆菌sonnei | 菌落光滑，最初无色，由于乳糖发酵后期，进一步培养变成淡粉色 |
| 弗氏志贺菌 | 菌落是无色的，在外观上类似于志贺氏杆菌sonnei |
| 沙门氏菌仕达屋优先计划 | 沙门氏菌发酵产生非乳糖 |
| 肠杆菌属/克雷伯氏菌spp。 | 大而苍白的黏液菌落，中心为粉红色。 |
| 变形杆菌/ Providenciaspp。 | 大，无色至棕褐色，中间有或没有黑色。普罗透斯菌落通常有光泽(比病原体的菌落更半透明)，中心有一个大黑点，有一种“鱼腥味”。 |
| 鼠疫enterocolitica | 无色 |
| Enterococci | 没有增长到轻微增长 |
参考资料和进一步阅读:
(您可从以下DCA介质厂家获取产品规格及详细信息)
