抗微生物药敏试验(AST):指南和最佳实践

抗生素敏感性测试应仅对临床有意义的分离株进行，而不是对培养中恢复的所有微生物进行。临床和实验室标准协会(CLSI)建议使用改进Kirby-Bauer法用于常规抗生素敏感性测试。

根据CLSI，为了避免错误，应该使用以下指南:

1. 抗生素片的直径应该正确(6.35毫米)。
2. 抗生素片的效力应该是正确的。
3. 库存应冷冻储存(-20°C)。
4. 工作电源应在冰箱(2-8°C)中保存不超过一个月。
5. 只能使用经过性能测试的Mueller Hinton琼脂。
6. 成品培养基的正确pH值(7.2-7.4)对某些抗生素至关重要。
7. 接种物应按照规定的浊度标准进行标准化。
8. 区域大小应精确测量。
9. 区域尺寸应参照临界直径表来解释。每种生物的区域直径应在限制范围内。

用标准菌株进行药敏试验，以评价和验证试验程序和药敏试验所用材料。这样的测试是应该进行的;

1. 新一批光盘投入使用时;
2. 新一批介质投入使用时;
3. 每周一次，与常规抗生素剂量同时进行。

在实践中常用的标准菌株有;

1. 金黄色葡萄球菌(写明ATCC 25923;
2. 大肠杆菌(写明ATCC 25922);
3. 铜绿假单胞菌(写明ATCC 27853)。

抗菌药物的选择

用于针对特定细菌分离物进行测试的抗菌剂是抗菌电池或抗菌面板。鉴于现有的抗微生物药物数量巨大，选择适当的抗微生物药物进行药敏试验可能具有挑战性。

某些微生物可以本质上抗对特定的抗菌类;因此，在体外测试特定药剂的活性是不必要的，而且会引起误解。生物本身具有耐药性的抗微生物药物通常被排除在测试组之外(例如万古霉素革兰氏阴性杆菌)。

呋喃妥英仅限于使用只用于治疗尿路感染，并且不应针对从尿液以外的物质中回收的微生物进行测试。

AST抗微生物药物选择的最佳实践

1. 同一类抗菌剂可具有相似的体外活性针对选定的细菌病原体。在这些情况下，应选择一种具有代表性的抗菌素，以预测对同一类其他成员的敏感性。
2. 如果对某一特定药剂的耐药性是普遍的，那么该药剂的效用就可能受到足够的限制因此，常规测试是没有必要的，只有更有效的抗微生物药物必须纳入测试小组。
3. 抗菌素开发用于对付特定的有机体必须只包括在该生物的测试小组中(例如头孢他啶是用于对抗铜绿假单胞菌但不是反对金黄色葡萄球菌）.
4. 抗生素必须能够达到解剖学上的近似。硝基呋喃妥因只在尿路中达到足够的水平，所以它不应该包括在针对来自其他身体部位的细菌分离物的测试中。
5. 测试板中使用的抗菌剂必须在当地市场/药店有售。
6. 抗菌素敏感性测试方法的使用也限制了抗菌素的使用，因为使用这种特定方法可能无法检测到特定药物的耐药性。
7. 应限制待测抗微生物药物的数量，以确保AST的相关性和实用性。
8. 建议定期审查目前可预测对特定抗菌药物敏感的微生物，以确保检测到突发的、意外的耐药性。在对标准抗菌药物治疗方案反应不佳之后，也可能怀疑出现耐药性。

抗微生物药敏试验药物集

世界卫生组织公布了在各种情况下进行常规药敏试验的基本药物。这些药分为两组。第一组包括大多数医院都能提供的药物，对每种菌株都应进行常规检测。

药物测试设置两个只有在医生的特殊要求下，或当致病生物对首选药物有耐药性时，或当其他原因(对某种药物过敏或无法获得)使进一步检测成为合理时，才可进行。

世卫组织表示，在极少数情况下，如果医生知道有特殊原因，或者有新的更好的药物可用，应该包括一种或多种额外药物。因此，定期修订这个清单是可取的，这应该在与临床工作人员进行适当的讨论后进行。实践中出现了许多问题，因为临床医生并不总是意识到常规检测中只包括一组具有代表性的抗微生物药物。这种特定药物的结果可以外推到该组的所有或大部分其他成员。

葡萄球菌

第一组:第一选择	第2组:附加药物
青霉素	庆大霉素
新青二	阿米卡星
红霉素	复方磺胺甲恶唑
四环素	克林霉素
氯霉素

肠肠杆菌科

第一组:第一选择	第2组:附加药物
氨苄青霉素	诺氟沙星
氯霉素
复方磺胺甲恶唑
四环素
萘啶酸

尿肠杆菌科

第一组:第一选择	第2组:附加药物
磺酰胺	诺氟沙星
甲氧苄氨嘧啶	氯霉素
复方磺胺甲恶唑	庆大霉素
氨苄青霉素
呋喃妥英
萘啶酸
四环素

从血液和组织中分离出来的肠杆菌科

第一组:第一选择	第2组:附加药物
氨苄青霉素	头孢呋辛
氯霉素	阿米卡星
复方磺胺甲恶唑	头孢曲松钠
四环素	环丙沙星
头孢噻吩	哌拉西林
庆大霉素

铜绿假单胞菌

第一组:第一选择	第2组:附加药物
哌拉西林	阿米卡星
庆大霉素
妥布霉素

1. 的青霉素圆盘用于测试对所有β-内酰胺酶敏感的青霉素(如口服phenoxymethylpenicillin和pheneticillin)的敏感性。
2. 氨苄青霉素是一组广谱青霉素的原型，对许多革兰氏阴性细菌都有活性。由于它对β-内酰胺酶敏感，不应用于检测葡萄球菌。一般来说，对氨苄西林的易感性也适用于该组的其他成员:阿莫西林、哌氨苄西林、他氨苄西林等。
3. Oxacillin圆盘代表了整个β-内酰胺酶耐药青霉素组(包括甲氧西林，nafcillin, cloxacillin，双氯西林和氟氯西林)。此外，有良好的临床证据表明，甲氧西林和头孢菌素组之间存在交叉耐药。因此，在葡萄球菌的抗生素图中包括头孢洛汀是无用的和误导的。唑西林片更耐变质，因此首选用于标准化扩散试验。
4. 四环素圆盘的结果可能适用于金霉素、土霉素和该组的其他成员。然而，大多数四环素耐药葡萄球菌通常对二甲胺四环素敏感。因此，米诺环素圆盘可用于检测葡萄球菌的多重耐药菌株。
5. 氯霉素盘的结果可以推断为硫霉素，一种具有类似抗菌谱的相关药物，但没有已知的再生障碍性贫血风险。
6. 红霉素用于测试对大环内酯类其他成员(奥夹桃霉素、螺旋霉素)的敏感性。
7. 试验中只需要一种具有代表性的磺胺(磺胺氟唑)。
8. 头孢噻吩。唯一一种头孢菌素需要常规检测，因为它的光谱代表了所有其他第一代头孢菌素(头孢氨苄、头孢拉定、头孢洛定、头孢唑林、头孢哌林)。如果第二代和第三代头孢菌素及相关化合物(头孢霉素类)具有扩大的光谱，则在选定的情况下(头孢西丁、头孢曼多、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢曲松)，其中一些新药可能需要单独的圆盘。虽然一些头孢菌素可用于治疗严重的葡萄球菌感染，但感染菌株的敏感性可由唑西林的结果得出
9. 复方新恶唑片含有甲氧苄啶和磺胺(磺胺甲恶唑)的组合。在复方新诺明中，这种协同组合的两种成分具有可比的药代动力学性质，通常“作为单一药物”发挥作用。
10. 氨基糖苷类包括链霉素、庆大霉素、卡那霉素、奈替米星和妥布霉素。它们的抗菌光谱并不总是足够接近，允许交叉耐药的假设，但对于易感病原体，这些药物已被证明同样有效。世卫组织强烈建议每个实验室选择一种单一药物进行初级药敏试验。其他药物应保留，以治疗由耐药生物引起的感染患者。