诊断HIV感染的检测可分为不同的类别:病毒培养、抗原检测、抗体检测和病毒基因组扩增(PCR)。
样品采集和运输
- 对于标准的HIV-1/HIV-2抗体检测,一管(10毫升)全血就足够了。
- 标本在室温下可保存3天,在4℃下可保存7天。
- 为了延长储存时间,必须将血清或血浆与血块或细胞分离,并在-20°C下储存。
- 用于PCR的标本通常需要在采集后48小时内进行处理,因为病毒DNA会随着时间的推移而变性,变得无法检测。
病毒培养
在感染的大多数阶段,病毒都可以从感染者身上分离出来。在IL-2存在的情况下,外周血单个核细胞(PBMC)可以与来自hiv阴性供体的活化PBMC共同培养。阳性结果可通过出现病毒抗原(p 24)或培养基中的逆转录酶活性来识别。
病毒培养不是常规实验室诊断方法的一部分。
抗原/抗体检测
抗体通常在感染后3至12周可检测到。一般来说,受感染的人终身保持抗体阳性,但艾滋病患者的抗体滴度经常下降(见图1).
应用最广泛的测试是间接测试和竞争测试ELISA这种疫苗主要使用病毒抗原的混合物。建议进行确认性试验,以排除假阳性结果的可能性。这些都是ELISA检测或Western blot分析抗体特异性。
- 艾滋病毒护理点检测(POCT)
这些检测以相对容易的方式提供快速的现场艾滋病毒检测结果。 - ELISA检测HIV
它通常被用作许多传染病的筛选试验,包括艾滋病毒。这是一个高度敏感的测试,但也会出现假阳性。在大多数情况下,艾滋病毒目前的“窗口期”(从接触血清转化的时间)不到三周。
注意:
所有HIV诊断实验室必须通过验证性化验确认重复的EIA筛查阳性结果(通过使用病毒抗原的不同部分完成),通常使用免疫印迹.
如果患者有症状或高风险,在第一次化验中筛查为阳性但在第二次化验中筛查为阴性的标本仍应考虑进行确认性检测。 - P24抗原检测
p24抗原检测也是基于酶免疫分析(EIA)的。抗体用于从患者血清中捕获中断的p24抗原。
P24抗原测试是有用的- 来自高风险和有症状但HIV eia阴性患者的标本(用于Ab测试),或
- 用于eia阳性但Western blot阴性或-不确定的标本
- 以确认新生儿感染艾滋病毒
免疫印迹试验
免疫印迹是HIV感染的确证诊断。Western blot是一种高度特异性的免疫印迹,可以显示HIV结构多肽的抗体。
病毒基因组扩增(PCR)
PCR技术在HIV感染诊断方面取得了重大进展。这种强大的技术可以在极短的时间内扩增目标DNA。当Ab检测不足以确定患者是否感染时,聚合酶链反应是有用的
- 诊断受感染母亲所生婴儿的艾滋病毒感染(产妇有IgG抗体,不包括产后头几个月的血清学测试)
- 解决不确定的Western blot结果和
- 检测免疫功能低下的个体,可能不会产生抗体反应。
血浆病毒血症(病毒粒子RNA)的定量测定逆转录PCR已成为跟踪未经治疗患者HIV感染进展和监测患者抗病毒化疗效果的主要工具。它与CD4计数一起使用。
CD4+淋巴细胞计数
慢性HIV感染的一个标志是CD4+淋巴细胞的减少,这些细胞的减少与获得特征性机会性感染密切相关。因此,CD4+淋巴细胞计数的监测是临床分期、抗病毒治疗开始和治疗的重要决定因素耶氏肺孢子菌预防肺炎。