苯丙氨酸脱氨酶试验也称为苯丙酮酸(PPA)试验是用来测试生物体产生脱氨酶的能力。这种酶从氨基酸苯丙氨酸中去除胺基,并产生苯丙酮酸(PPA)和氨,即苯丙氨酸的氧化脱氨。苯丙酮酸与铁酸反应(在培养基中加入10%的氯化铁)产生可见的绿色。
苯丙氨酸琼脂,又称苯丙氨酸脱氨酶培养基,含有dl -苯丙氨酸和营养物质。
介质和试剂
苯丙氨酸琼脂培养基准备好,斜倒进管中。介质的组成如下:
- dl -苯丙氨酸:2克
- 酵母提取物:3克
- 氯化钠:5克
- 磷酸二钠:1克
- 琼脂:12克
- 蒸馏水:1l
- pH值:7.3
酵母提取物是碳源和氮源。肉类提取物或蛋白质水解物不能使用,因为苯丙氨酸的天然含量不同。
试剂
- 氯化铁:12克
- 浓缩盐酸:2.5 mL
- 蒸馏水:100毫升
过程
- 取或准备苯丙氨酸脱氨酶琼脂培养基
- 将苯丙氨酸斜体(表面有一个环)与试验生物接种。
注意:如果您是第一次使用苯丙氨酸琼脂培养基,请使用阳性(寻常变形杆菌)和阴性对照(大肠杆菌)来检查试验培养基的功效。 - 在37度的温度下培养试验培养基°C一夜之间。
- 加入4-5滴10%的氯化铁水溶液(FeCl3.)解决倾斜。加入试剂后,旋转试管以除去表面菌落。
结果
- 积极的测试:生产绿色(由此形成的苯丙酮酸与氯化铁反应产生绿色化合物,从而使介质变成深绿色).Proteus sp., Morganella sp., Providenica sp.PPA测试呈阳性。
- 负:颜色不变(中色保持草黄色;没有PPA与氯化铁反应)。
苯丙氨酸脱氨酶试验用途
苯丙氨酸脱氨酶试验用于鉴别属成员变形杆菌、摩根氏菌属,Providencia的其他成员(+ve)肠杆菌科结果是消极的。
质量控制
每一批新的培养基或试剂都必须进行阳性和阴性对照试验。
先生您好,我想问您,在大便湿装中,如果我们看到内阿米巴的囊肿或滋养体,我们是否报告为内阿米巴的囊肿或滋养体。或者我们可以报告内阿米巴的历史,因为书中提到,细胞内结构在湿贴体中不被很好地理解。在同一大便中也可以看到囊肿和滋养体的形成。
你好Varsha
内阿米巴只有一种,即。E.histolytica在医学上很重要因为它会导致阿米巴病在粪便中发现其他种类的内阿米巴原虫(无害的共约体)对诊断没有帮助。囊肿的E.histolytica通过观察细胞核的数量就可以区别于其他人,而如果你看到滋养体,你必须寻找特征诊断特征(红细胞的存在)和细胞核的性质。一般情况下,囊肿见于成型/半成型便,滋养体见于水样便,但有时两者均可出现。点击这里了解更多
这次测试的成本!!(PPA)