硫化物吲哚动力(SIM)培养基是一种不同的细菌生长培养基,用于检测生物体的三种不同特征;
- 年代硫还原和(H2S)硫化物生产
- 我Ndole生产和
- 米细菌的活力
硫还原试验是鉴别肠道生物的有效方法。SIM琼脂比两者都更敏感TSI或克钦独立军在检测H2年代生产.吲哚测试是一种IMViC系列测试。运动性测试对于测试各种各样的生物是有用的。SIM测试对于区分的成员是有用的肠杆菌科,主要用于求导沙门氏菌而且志贺氏杆菌。
左:kigler’s铁琼脂(KIA),右:弱H接种的硫化物吲哚活力(SIM)2产硫生物(沙门氏菌伤寒)。在KIA中,在倾斜和对接的界面处可以看到管的中间发黑,但在SIM中,在整个介质中可以看到弥漫的微妙发黑。
作文
SIM培养基中含有酪蛋白的胰消化(酪蛋白蛋白胨)、动物组织的消化(肉蛋白胨)、作为铁源的硫酸亚铁铵和硫代硫酸钠。蛋白胨含有氨基酸,包括色氨酸。
成分 | 量(克/升) |
酪蛋白胨 | 20克 |
肉胨 | 6克 |
硫代硫酸钠 | 0.3克 |
柠檬酸铁铵 | 0.2克 |
琼脂 | 3.5克 |
软化水 | 1000毫升 |
pH 7.3±0.2,25°C。 |
原则
将被试生物体接种到半固态培养基硫化物-吲哚-活力琼脂上,并测试硫化氢、吲哚的产生和生物体的活力。
产生硫化氢的生物产生氢2年代气体它与SIM中的铁盐、硫酸亚铁和柠檬酸铁铵反应,产生黑色沉淀物。
产生吲哚的生物分解色氨酸利用色氨酸酶在SIM琼脂中产生吲哚。吲哚的产生由科瓦奇或埃利希试剂检测,其中含有4 (p)-二甲氨基苯甲醛。它与吲哚反应产生松香多尔染料,一种红色的化合物。
非运动生物只生长在刺线上,周围的介质保持清晰。有活动的生物移出刺线,使整个管子看起来浑浊。
过程
- 在SIM培养基上标记生物名称或实验室识别号(以适用者为准)。
- 使用无菌接种针,触摸一个隔离良好的菌落的中心。接种量应该很大,但不需要特别重。
- 无菌尝试一次以1/3至1/4英寸的深度在相应的管中间。
- 取出针头,用焚化炉消毒本生灯或者微型焚化炉。
- 用同样的方法无菌接种其余的试管。
- 在35 - 37℃进行有氧培养°C18到24小时。
结果
在添加试剂以检查吲哚的产生之前,观察黑色沉淀物的运动性和形成。
能动性
检查刺穿线是否有辐射(模糊)生长,或者拿一张打印好的纸放在管子后面,试着透过管子读出来。
- 活动生物会从接种部位扩散到培养基中。
- 不活动的生物留在接种部位
了解更多运动试验介质
硫化生产
对于硫还原,观察任何黑色的位置。发黑通常从接种线开始,黑色可能出现在整个介质中,或在对接处出现黑色沉淀物。
吲哚试验
加入几滴科瓦奇或埃利希试剂。
- 吲哚阳性:加入试剂后呈红色环
- 吲哚阴性:添加试剂后无颜色变化
阅读更多吲哚试验
所选菌的SIM检测结果
生物名称 | 硫化 | 吲哚 | 能动性 |
大肠杆菌 | 没有H2年代 | 积极的 | 运动的(少数菌株是非运动的) |
霍乱弧菌 | 没有H2年代 | 积极的 | 能动的 |
枸橼酸杆菌属freundii | 变量 | 阳性(少数菌株给出阴性结果) | 能动的 |
弧菌parahaemolyticus | 没有H2年代 | 积极的 | 能动的 |
肠杆菌属仕达屋优先计划 | 没有H2年代 | 负 | 能动的 |
变形杆菌属寻常的 | H2年代生产商 | + ve | 能动的 |
变形杆菌 | H2年代生产商 | 负 | 能动的 |
肺炎克雷伯菌 | 没有H2年代 | 负 | 不动的 |
鼠疫enterocolitica | 没有H2年代 | 变量 | 能动的 |
摩根氏菌属morganii | 没有H2年代 | 积极的 | 能动的 |
Providenciaspp。 | 没有H2年代 | 变量 | 能动的 |
痢疾 | 没有H2年代 | 变量 | 不动的 |
弗氏志贺菌 | 没有H2年代 | 变量 | 不动的 |
志贺氏杆菌鲍氏 | 没有H2年代 | 变量 | 不动的 |
志贺氏杆菌sonnei | 没有H2年代 | 负 | 不动的 |
沙门氏菌甲型副伤寒 | 阴性(<13%分离株为H2生产商) | 负 | 能动的 |
沙门氏菌乙型副伤寒 | 积极的 | 负 | 能动的 |
沙门氏菌甲型副伤寒C | 阳性(少数株为H2S nonproducers) | 负 | 能动的 |
沙门氏菌伤寒 | 积极的(弱) | 负 | 能动的 |
其他沙门氏菌型 | 阳性(少数株为H2S nonproducers) | 负 | 能动的 |
*志贺氏杆菌sonnei吲哚阴性,其他志贺菌给予不同的吲哚反应。沙门氏菌血清吲哚阴性。克雷伯氏菌oxytoca是吲哚阳性。
相似类型的生化培养基
- Motility-indole-ornithine琼脂
- 动力吲哚脲酶培养基
参考文献和进一步阅读
- 利用SIM介质图像测定吲哚产量的替代方法。ASM教育
- 硫,吲哚,动力(SIM)介质。怀俄明大学。检索于2022年10月8日,从http://www.uwyo.edu/molb2021/additional_info/summ_biochem/sim.html
- SIM的媒介。Microbugz。检索于2022年10月8日,从https://www.austincc.edu/microbugz/sim_medium.php