三糖铁(TSI)琼脂:原理，结果和解释

当你看到这个测试的名字时，例如。三糖铁琼脂’，你必须记住，这是一个考试三个糖(乳糖，蔗糖和葡萄糖)和铁;含有琼脂作为固化剂(TSI是一种有斜有对接的半固态介质)。

TSI琼脂的组成

成分	克/升
牛肉膏	3.0克
酵母提取物	3.0克
蛋白胨	20.0克
葡萄糖	1.0克
乳糖	10.0克
蔗糖	10.0克
硫酸亚铁或硫酸亚铁铵	0.2克
生理盐水	5.0克
硫代硫酸钠	0.3克
酚红	0.024克
琼脂	13.0克
蒸馏水	1000毫升

乳糖、蔗糖和葡萄糖的浓度为10:10:1(即10份乳糖(1%)、10份蔗糖(1%)和1份葡萄糖(0.1%))。TSI和克利格勒铁琼脂(KIA)，除了克利格勒的铁琼脂只含有两种碳水化合物:葡萄糖(0.1%)和乳糖(1%)。

• 0.1%的葡萄糖如果只发酵葡萄糖，只产生足够的酸使屁股变黄。斜面将保持红色。
• 1.0%乳糖/1.0%蔗糖:如果乳糖或蔗糖或两种糖都发酵，会产生大量的酸，使屁股和斜面都变黄。因此，斜面和臀面呈黄色表明该菌株具有发酵乳糖或蔗糖或两者兼有的能力。
• 铁(硫酸亚铁):H₂年代形成
• 酚红:酸化指标(为酸性条件下黄色碱性条件下的红色)。
• 它还包含蛋白胨它作为氮的来源(记住，无论何时在有氧条件下使用蛋白胨，都会产生氨)。

为什么TSI琼脂中添加蔗糖?

在TSI琼脂中添加蔗糖可以较早地检测出发酵蔗糖比乳糖更快的大肠菌群。添加蔗糖还有助于鉴定某些革兰氏阴性细菌，这些细菌可以发酵蔗糖，但不能发酵乳糖。另一个基本认识是TSI管中含有一种屁股-底部缺氧区域和a偏-顶部角度良好的含氧区域。

TSI琼脂的制备

• 混合原料，调整pH值至7.3
• 煮沸以溶解琼脂
• 把它分到管子里
• 消毒的121℃高压灭菌15分钟
• 倾斜的姿势让臀部有2.5厘米，倾斜3.8厘米。

TSI琼脂也可以在市场上买到

TSI琼脂试验程序

1. 用消毒过的直接种针接触隔离良好的菌落顶部
2. 接种TSI琼脂，首先刺穿培养基中心至试管底部，然后在琼脂表面斜划条纹。
3. 将盖子松开，在35°C的环境空气中培养试管18至24小时。

TSI琼脂试验原理

1. 如果乳糖(或蔗糖)发酵，产生大量的酸，使酚红指示剂在屁股和斜面上变黄。有些生物会产生气体，从而在介质中产生气泡/裂缝。
2. 如果乳糖不发酵，但少量葡萄糖发酵，缺氧的臀部会是黄色的(记住，臀部比斜面有更多的葡萄糖，即更多的介质和更多的葡萄糖)，但在斜面，产生的酸(在斜面产生的酸更少，因为斜面的介质更少)将被生物体氧化为二氧化碳和水，斜面将是红色的(碱性或中性pH值)。
3. 如果乳糖/蔗糖和葡萄糖都没有发酵，臀部和斜面都是红色的。由于氨基酸氧化脱氨产生氨(记住蛋白胨是TSI琼脂的主要成分)，斜面可以变成更深的红紫色(更碱性)。
4. 如果H₂年代生产时，可见硫化亚铁的黑色。

TSI琼脂试验预期结果

1. 偏碱性/屁股无变化(K/NC)即红/红=葡萄糖、乳糖和蔗糖非发酵剂
2. 碱性斜面/碱性屁股(K/K)即红/红=葡萄糖、乳糖和蔗糖非发酵剂
3. 碱性斜面/酸性对接(K/A);红/黄=葡萄糖发酵，气体(+或-)，H₂年代(+或-)
4. 酸斜/酸臀(A/A);黄/黄=葡萄糖，乳糖和/或蔗糖发酵罐气体(+或-)，H₂年代(+或-)。

三糖铁(TSI)琼脂试验结果

生物名称	偏	屁股	气体	H2年代
埃希氏杆菌属，克雷伯氏菌肠杆菌属,	酸()	酸()	Pos (+)	底片(-)
志贺氏杆菌、沙雷氏菌属	碱性(K)	酸()	底片(-)	底片(-)
沙门氏菌，普罗透斯	碱性(K)	酸()	Pos (+)	Pos (+)
假单胞菌	碱性(K)	碱性(K)	底片(-)	底片(-)