哥伦比亚琼脂colistin和na利地西酸(CNA)是一种有选择性的而且鉴别培养基用于从临床和非临床样本中分离和鉴别致病性革兰氏阳性球菌。抗菌剂粘菌素(C)和萘啶酸(NA)可抑制革兰氏阴性菌。
粘菌素，一种多肽抗生素的多粘菌素组，破坏革兰氏阴性生物的细胞膜。萘啶酸是第一代喹诺酮类药物，可阻断易感革兰氏阴性细菌的DNA复制。
哥伦比亚琼脂基础是一种营养丰富的配方，含有三种蛋白胨来源和5%去纤维(全血与纤维蛋白去除，以防止凝血)羊血。这种支持性介质是用来区分基于溶血反应的菌落。
革兰氏阴性细菌等成员肠杆菌科而且假单胞菌物种被抑制，而葡萄球菌，链球菌，肠球菌和酵母生长在哥伦比亚CNA琼脂。
作文
哥伦比亚CNA琼脂是在哥伦比亚琼脂碱中加入10 mg/升粘菌素和15 mg/升萘啶酸制备的。
哥伦比亚琼脂是一种富含营养的培养基，含有5%的去纤维血液。羊血为挑剔的革兰氏阳性细菌的生长提供X和V因子，并根据溶血反应帮助区分它们。
蛋白胨支持微生物的繁茂生长。玉米淀粉是中和剂的来源。Columbia CNA琼脂的组成如下*;
| 产品 | 克/升 |
| Casein-Meat蛋白胨 | 10克 |
| Casein-Yeast蛋白胨 | 10克 |
| 心蛋白胨 | 3 g |
| 氯化钠 | 5克 |
| 玉米淀粉 | 1克 |
| 琼脂 | 13.5克 |
| 去纤维羊血 | 50毫升 |
| 硫酸粘菌素 | 10毫克 |
| 萘啶酸 | 15毫克 |
| pH: 7.3 +/- 0.2 |
*不同制造商配制的介质可能会有不同的成分。
培养基制备
- 将44.02克悬浮在1000毫升纯化/蒸馏水中。
- 加热至沸腾，使介质完全溶解。不要使介质过热。
- 用高压灭菌器在15磅压力下，121度下消毒15分钟。
- 冷却至45-50°C，无菌加入5% v/v无菌，去纤维的血液。
- 混合均匀后倒入无菌室佩特里盘子(每板20-25毫升，90毫米培养皿)。
储存及保质期
哥伦比亚CNA琼脂应避光保存，并在4°C至8°C保存。
培养基面应在最上面，以防止琼脂表面积聚过多的水分。在这些条件下，培养基自制造之日起有8周的保质期。
质量控制
在检查正确的pH值、颜色、深度和无菌性后，使用以下微生物来确定完成培养基的生长性能。
培养基接种
- 接种前让培养基达到室温。
- 使用标本的直接接种物，进行四象限条纹以获得良好隔离的菌落。如果需要，还可以将其插入培养基中，以改善和更好地观察溶血反应。
- 根据感兴趣的生物体，在35°C的富co2环境中进行有氧、厌氧培养。部分链球菌的溶血反应受培养箱大气环境的影响。为了获得最佳结果，培养板在5%的富含二氧化碳的环境中培养。
- 24和48小时后检查。
结果解释
孵育后，检查板的生长和溶血情况。观察溶血情况时，在培养板后透过强光观察培养板。在Columbia CNA琼脂中可以看到四种溶血类型:
- Alpha-hemolysis:局部溶血导致菌落周围呈绿色。
- Beta-hemolysis:红细胞完全裂解，在菌落周围形成透明区。
- γ溶血:无溶血，介质无变化。
- Alpha-prime-hemolysis:被部分溶血区包围的完全水解的小区域。
使用
在常规血琼脂上，革兰氏阴性杆菌可能比革兰氏阳性球菌长。哥伦比亚CNA琼脂有助于分离革兰氏阳性球菌(链球菌和葡萄球菌)与革兰氏阴性杆菌混合培养时。羊血的加入有助于区分种链球菌也
参考文献
- 贝利和斯科特的诊断微生物学，福布斯，第11版
- 科尼曼诊断微生物学彩色图集与教材第七版