在粪便标本中，原生动物和/或蠕虫寄生虫的寄生形式的数量往往太低，无法在显微镜下观察到直接湿式支架或者在染色涂片准备中。在这种情况下，使用浓缩技术增加了检测寄生生物的机会，从而增加了共生显微镜技术的灵敏度。
最常用的两种大便浓缩技术是沉积而且浮选．沉淀技术通常在一般诊断实验室进行，因为它们更容易执行，更不容易出现技术错误。
形式醚沉淀技术原理
沉积技术使用比重较低的溶液而不是寄生生物，因此后者集中在沉积物中。
与水相比，它利用了原生动物囊肿和蠕虫卵的高比重。它们在水溶液中沉淀的自然趋势可以通过轻度离心加速。
福尔马林固定卵、幼虫、卵囊和孢子，使它们不再具有传染性，并保持它们的形态。粪便残渣被提取到溶液的乙酸乙酯相中。寄生元素沉淀在底部。
所需的材料
- 玻璃容器
- Guaze
- 漏斗
- 离心管(容量15ml)
- 离心机
- 生理盐水(0.85% w/v NaCl)
- 10%缓冲福尔马林
- 乙醚(乙酸乙酯)
- 有塞子的试管
- 玻璃棒
- 碘
- 显微镜
形式醚沉淀技术程序
- 处理粪便标本时要戴手套。
- 在一个合适的容器中，将核桃大小的部分粪便标本完全混合到10mL生理盐水溶液中。彻底混合。
- 将乳化液通过细网纱布过滤入锥形离心管。
- 以600g(约2000rpm)的相对离心力(RCF)离心不少于10分钟。悬液应产生约0.75mL的新鲜标本沉积物和0.5 mL的正规化粪便。
- 滗出上清液，用10ml生理盐水清洗沉淀物。再次离心，重复洗涤，直到上清清。
- 最后一次清洗后，滗出上清液，向沉淀物中加入10毫升10%的福尔马林。混合后静置5分钟即可固定。
- 加入1 - 2毫升乙酸乙酯，塞上管子，用力摇晃。
- 以450克RCF(约1500 rpm)离心10分钟。四层结果如下所示
- 一层最上层的乙酸乙酯;
- 堵塞杂物;
- 一层福尔马林;而且
- 沉积物
- 用滴管棒环响，从管的侧面将碎屑从塞子中取出。小心地倒入最上面的三层。
- 用移液管将剩余的沉淀物与少量或剩余的液体混合，并将每一滴转移到玻璃载玻片上的盐水和碘中。用覆盖物盖住并在显微镜下检查寄生形式的存在。
质量控制
- 每次使用时检查溶液，以确保它们是干净的，没有任何细菌污染。
- 将已知阳性标本通过程序检验，以验证生物体的恢复情况。每年至少要做两次。
观察与结果
用10倍物镜系统地检查每个覆盖物的整个表面，如果需要识别，则系统地使用显微镜的高倍物镜，以便观察到整个覆盖物区域。当看到生物体或可疑物体时，切换到更高的放大倍率(40X)，以查看有关物体的更详细形态。
步骤说明-沉降技术
- 沉淀法也可用于聚乙烯醇(PVA)固定试样的处理。步骤完成后，用粪便-聚乙烯醇混合物锉开半根管，并在管的顶部几乎加入0.85%的NaCl。然后通过湿纱布将混合物过滤到15毫升的离心管中，并遵循剩余的标准程序。
- 如果使用的是乙酸乙酯，在清理堵塞的碎屑并倒出多余的液体后，用棉签棒擦拭试管内部。在准备涂片时，沉积物中过量的乙酸乙酯将导致气泡，可能会掩盖人们试图观察的寄生形式。
- 如果在沉降过程中使用过多或过少的粪便，可能会出现解释上的错误。坚持建议的配方0.75 mL的沉积物新鲜标本和0.5 mL的正规化粪便。
- 在监控时间之前，允许离心机达到最大转速。如果离心时间过短，某些较小的寄生形态，如卵囊隐孢子虫种，可能达不到沉淀物。
沉淀技术的局限性
- 某些寄生虫，比如兰伯氏贾第虫，钩虫卵，还有鞭虫卵可能无法从pva保存的标本中很好地浓缩。卵囊等孢子球虫属瑞塔不经常出现在浓缩物中。因此，强烈建议检查永久染色的涂片。
- 使用沉降和浮选技术，不一定在所有情况下都能鉴定物种，这取决于观察到的形态的清晰度。永久染色的涂片通常需要作出最后的鉴定，特别是在试图确认的身份痢疾阿米巴．
参考文献和进一步阅读
- 粪便标本检查。在。诊断医学寄生虫学。华盛顿特区:美国微生物学会。
- 华盛顿WJ等人，科尼曼的彩色图集和诊断微生物学教科书．第六版:Lippincott Williams & Wilkins出版社
