大多数嗜血杆菌物种是人类和其他动物上呼吸道的正常居民。的种类Haemophilu最常引起人类感染的是流感嗜血杆菌(呼吸道和侵入性感染)，h . aegyptius(急性结膜炎),副流感嗜血杆菌溶血性嗜血杆菌副溶血性嗜血杆菌，h . aprophilus，h . paraphrophilus而且h . segnis(脓肿和感染性心内膜炎)。
- 它们是多形性的革兰氏阴性coccobacilli．
- 实验室诊断流感嗜血杆菌是基于增长和菌落形态在巧克力琼脂，细胞形态上革兰氏染色法．
- 该属的血友病特征证实了这一点，反映了对两者之一或两者的需求因子叫做X和V．X因子包括血素或其他含铁卟啉，V因子包括烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)。
疾病
流感嗜血杆菌可引起多种感染。从轻微的耳部感染到严重的疾病，如脑膜炎。流感嗜血杆菌细菌最常引起肺炎、菌血症和脑膜炎主要发生在婴儿和五岁以下的儿童。
注意:尽管它的名字叫流感嗜血杆菌不会引起流感(“流感”)
有六种可识别的类型流感嗜血杆菌细菌(a到f)和其他不可识别的类型(称为不可分型)。流感嗜血杆菌b型或Hib与大多数临床病例相关，这些病例也有疫苗可用。
| 疾病 | 物种 | 培养标本 |
| 脑膜炎 | 流感嗜血杆菌b型 | 脑脊液(CSF);血 |
| 会厌 | 流感嗜血杆菌b型 | 血;喉分泌物 |
| 中耳炎 | 流感嗜血杆菌nontypeable菌株 | 耳道引流拭子;针的愿望。如果怀疑全身疾病，建议进行血液/脑脊液培养 |
| 急性鼻窦炎 | 流感嗜血杆菌通常是不可分型的菌株;在极少数情况下h . 56也涉及到 | 鼻窦抽吸，手术标本 |
| 急性咽炎/喉气管支气管炎 | 流感嗜血杆菌b型 | 后咽拭子;喉分泌物 |
| 支气管炎 | 流感嗜血杆菌nontypeable菌株 | 痰;transtracheal吸入物;支气管洗液 |
| 肺炎 | 流感嗜血杆菌b型;如老年患者可能涉及非分型菌株 | 痰;气管吸入物;支气管洗液 |
| 心内膜炎 | h . aphrophilus;h . paraphrophilus;h . 56;很少，流感嗜血杆菌 | 血 |
| 生殖道感染及产后菌血症 | 不可分型的H.流感;h . 56 | 尿道和宫颈内标本;血。 |
| 结膜炎 | 埃及伊蚊流感嗜血杆菌生物群 | 结膜拭子 |
| 软性下疳 | h . ducreyi | 生殖器溃疡拭子;从阴部吸出;子宫抹片 |
| 巴西紫癜热 | 埃及伊蚊流感嗜血杆菌生物群 | 血;结膜拭子;皮肤损伤 |
样本
用于实验室诊断的标本流感嗜血杆菌可能是
- 呼吸道标本:痰，肺吸液，胸膜液
- 体液，体液血液/脑脊液
- 渗出液从关节，中耳，其他部位
样品收集
- 痰:
收集> 1.0 ml痰液于无菌螺旋盖容器中。 - 肺抽液/胸膜液
经皮穿刺取血> 1.0 ml于无菌螺旋盖管中。 - 血:
用70%酒精和碘清洗静脉穿刺部位，使其蒸发，并在含有抗凝血剂的培养液中无菌收集血液。成人在培养瓶中采血5- 10ml， < 12岁儿童采血1.5-2.0 ml。将血液和肉汤轻轻旋转，以避免凝结。 - 脑脊液(CSF):
用70%酒精和碘在L3-L4间隙清洁皮肤。在无菌螺旋盖管中收集> 1.0 ml CSF。如果不立即处理，则将CSF保存在35-37摄氏度的培养箱中。 - 关节/中耳有分泌物
在无菌螺旋盖管中吸取> 1.0 ml或直接加入用于血液培养的培养液中。
注意:不冷藏样品
样品运输
流感嗜血杆菌是一种挑剔的细菌。在标本的运输过程中必须小心。标本必须及时运送到实验室，最好在1-2小时内。
血液只有在含有适当抗凝剂的培养液中收集后才能运输。接种培养基可在室温(20°C - 25°C) 4 - 6小时，然后在37℃孵育°C.样品在运输过程中应避免极端温度(小于18°C, 30以上°C)和阳光直射。
直接检查
- 进行革兰氏染色
- 革兰氏染色显示革兰氏阴性多形性细棒或球菌。
文化
- 将样本接种到巧克力琼脂培养基上(想想为什么不呢?血琼脂或任何其他媒体)
- 37°C在含5-10% CO的好氧环境中孵育224-48小时。
菌落形态巧克力琼脂：
- 大而平，无色至灰色或不透明的菌落。
- 菌落为0.5 - 1mm圆形，低凸，光滑，浅灰色，透明。
- 带有典型的“老鼠窝”气味。未见溶血或变色。
- 被囊的菌株出现更多的粘液(水)和非被囊的菌株出现紧密的灰色菌落。
注意:巧克力琼脂能促进生长satellitism周围金黄色葡萄球菌可见于血琼脂上。
分化的生化反应。
X和V因子要求的确认性测试。
- 从巧克力琼脂中接种一个可疑菌落缪氏琼脂盘子。
- 将市售的X、V和XV因子光盘/带放在有条纹的板上。
- 在37°C的5-10% CO中孵育板2气氛18-24小时。
- 观察椎间盘周围的生长流感嗜血杆菌只会在合并后的XV盘周围生长。
请注意如果只有X和V因子盘(没有XV)，将它们放置至少2厘米，并且流感嗜血杆菌会在两个圆盘之间生长。
的血清学鉴定(血清分型)流感嗜血杆菌
针对血清型“a”至“f”的凝集抗血清在市面上有售。这种血清含有针对患者血清中存在的体细胞抗原的抗体，从而导致凝集。
玻片凝集试验．
- 在载玻片上滴一滴生理盐水，用一个疑似菌落制成均匀的悬浮液流感嗜血杆菌．
- 加入一滴特异性抗血清，充分混合。
阅读
- 在1分钟内观察凝集(可见结块)。
解释．
- 1分钟内可见结块表示阳性反应。
抗菌药敏试验．
- 对选定的一组抗菌素进行药敏试验disk-diffusion方法．
- 按照手册中提供的标准技术操作。
