大多数种类的嗜血杆菌成长需要X和V因素。当红细胞将V因子释放到培养基中时,细菌可以利用它。相反,血红素是在完整的红细胞内发现的,直到红细胞被溶解才可用。所以h . influenaze不能在血琼脂中生长。
金黄色葡萄球菌在含有血液的培养基中生长时产生NAD作为代谢副产物,并在溶解红细胞时释放hemin。因此,嗜血杆菌SPP可以生长在羊血琼脂上,非常靠近菌落金黄色葡萄球菌;这种现象被称为卫星效应。
为什么嗜血杆菌需要X和V因子?
流感嗜血杆菌利用因子X产生必要的呼吸酶,如细胞色素、过氧化氢酶和过氧化物酶。因子V是生物氧化还原系统中的电子载体。
目录
测试生物
任何只在巧克力琼脂上生长而不是在血液琼脂上生长的生物嗜血杆菌或弗朗西斯氏菌属革兰氏染色(革兰氏阴性coccobacilli或短杆)。
质量控制
- 演示在每批血液琼脂板上使用葡萄球菌和流感嗜血杆菌写明ATCC 43065
- 定期确认菌株没有被污染。
卫星试验程序
- 混合一圈可疑的菌落嗜血杆菌菌落置于约2毫升无菌生理盐水(或无菌蛋白胨水)中。确保没有巧克力琼脂完成媒体传输。
- 使用无菌棉签,将微生物悬浮液接种在一个培养皿上营养琼脂或胰蛋白酶大豆琼脂
B.一盘琼脂血 - 条纹是一种纯粹的文化金黄色葡萄球菌在每个接种板上
- 将两个培养皿在35 - 37°C富含二氧化碳的环境中孵育18-24小时。
- 检查培养板的生长和卫星菌落
观察和解释
一个微小的革兰氏阴性棒或球芽杆菌的阳性结果表明该生物属于该属嗜血杆菌.
可疑的菌落可以推定为流感嗜血杆菌如果:
- 在血液琼脂中可见生长,但在营养琼脂(或胰蛋白酶大豆琼脂)平板中未见生长
- 圆柱附近的殖民地金黄色葡萄球菌增长比那些离增长最远的国家要大
- 如果在血液和营养琼脂板上都有卫星菌落,那么该生物可能是嗜血杆菌只需要因子V的物种,例如h . 56(金黄色葡萄球菌菌落提供v因子)
- 有些微生物只在巧克力琼脂上生长,而不会在血液琼脂上生长葡萄球菌点。这些包括土拉杆菌内,一些Methylobacterium,而且嗜血杆菌ducreyi。
- 嗜血杆菌haemolyticus而且h . parahaemolyticus可能不会表现出卫星现象,因为它们是溶血的。
请注意偶尔,卫星主义表现为奈瑟氏菌属,链球菌物种和白喉类。
有趣的事实:
流感嗜血杆菌它是第一个进行基因组(完整的遗传密码)测序的自由生物。
参考文献和进一步阅读
- 临床微生物程序手册,第四版。(2016)。美国微生物学会。
- 诊断微生物学彩色图集与教材,科尼曼,第5版
- Musher DM.嗜血杆菌种。在:男爵S,编辑。医学微生物学第四版。加尔维斯顿(德克萨斯州):德克萨斯大学加尔维斯顿医学分校;1996.章30。可从:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK8458/