碳青霉烯酶检测的改进Hodge试验

改良Hodge试验(MHT)是一种检测细菌中碳青霉烯酶存在的简单表型试验。中观察到MHT试验阳性肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)、金属-β-内酰胺酶(MBL)和SME-1粘质沙雷氏菌．改良Hodge试验(MHT)已被建议作为碳青霉烯酶的筛选试验。

它基于产生碳青霉烯酶的菌株(试验分离株)对碳青霉烯的失活，从而使碳青霉烯敏感的指示菌株(大肠杆菌ATCC®25922)与试验菌株的接种体一道，向含碳青霉烯的圆盘生长。阳性检测结果为三叶草样压痕。

要求:

培养基: muller - hinton肉汤(MHB)，缪氏琼脂(MHA)

生物:

1. 大肠杆菌ATCC 25922(指示生物)
2. 肺炎克雷伯菌ATCC®BAA-1705™(阳性对照)
3. 肺炎克雷伯菌ATCC®BAA-1706™(阴性对照)
4. 试验菌株(对碳青霉烯类药物敏感性降低的菌株)

其他:盐水，棉签，镊子，接种环，0.5麦克法兰标准

改进Hodge试验(MHT)程序

1. 准备0.5麦克法兰稀释大肠杆菌ATCC 25922(指示生物)5毫升肉汤或生理盐水。
2. 加入0.5毫升，稀释1:100.5麦克法兰到4.5 ml的MHB或生理盐水。
3. 条纹草坪的稀释为1:10E．杆菌ATCC 25922呼叫aMueller Hinton琼脂(MHA)装盘，晾干3-5分钟。
4. 将10µg美罗培南或厄他培南药敏盘置于试验区中心。
5. 在一条直线上，条纹测试生物从盘的边缘到板的边缘。QC应变在另一个方向重复同样的步骤。(一种药物最多可以在同一平板上测试四种微生物。)
6. 在35°C±2°C环境空气中孵育16-24小时。

解释/结果

在孵育16-24小时后，检查培养皿，在测试生物体和培养皿的交叉处是否有三叶草叶状的压痕大肠杆菌25922，在碳青霉烯类药敏盘的抑制区内。

A. MHT阳性检测有三叶草一样的凹痕大肠杆菌25922沿圆盘扩散区内的测试生物生长条纹生长。
阳性测试表明碳青霉烯酶生产的测试微生物。通过产生碳青霉烯酶，测试微生物能够灭活从圆盘上扩散的碳青霉烯，圆盘被放置在MHA上。这使得碳青霉烯易受影响大肠杆菌ATCC®25922™向磁盘方向生长。

B. MHT阴性有没有成长的大肠杆菌25922沿试验生物生长条纹在圆盘扩散区内。

MHT的局限性

• MHT对大多数碳青霉烯酶表现出可接受的敏感性，特别是KPC酶，但对MBLs的敏感性较低。
• 隔离生产增谱内酰胺酶或AmpC头孢菌素酶与孔蛋白结合188.博金宝 MHT的特异性有限(约91%)
• 它的解释有时具有挑战性和耗时，因为它需要在AST结果可用后额外的24小时生长步骤。

进一步的阅读

1. 获取详细信息改进的Hodge试验用于肠杆菌中carpenter酶的检测在CDC网站