CAMP测试:原理、程序和结果

CAMP测试用于对的推定识别B组beta-hemolytic链球菌;链球菌agalactiae．

该试验对“迅速可靠”的鉴别是有效的链球菌agalactiae在临床实验室。由于结果在短短18小时内就会出现，并且需要很少的操作，因此很少会出现假阳性链球菌。这种溶血现象在1944年首次被描述克里斯蒂、阿特金斯而且Munch-Petersen， CAMP测试为首字母缩写为了他们的名字。

原则CAMP测试

CAMP测试的基础是β -溶血素产生菌株的溶血活性增强金黄色葡萄球菌由B组链球菌产生的细胞外蛋白(CAMP因子)引起。协同溶血在血琼脂板来自-溶血素与因子相互作用的结果。B组链球菌的溶血性和非溶血性菌株均表现出这种现象。

质量控制

用阳性和阴性对照测试每一批β -溶血素试剂或圆盘，将它们平行于被测生物体排成一条直线。

生物

• 美国agalactiaeATCC 12386-CAMP测试呈阳性
• 酿脓链球菌ATCC 19615-CAMP测试阴性。
• 定期使用内部实验室菌株Arcanobacterium haemolyticum为训练目的演示反向CAMP测试。

CAMP测试程序

标准方法

• 首先，做一条产生β -溶血素的直线金黄色葡萄球菌在血液琼脂板的中心，
• 然后，接种测试生物体的条纹(有待鉴定的乙型溶血性链球菌)垂直于葡萄球菌条纹．注意不要与葡萄球菌条纹相交。

注意:这样做这些条纹，在孵化后，两种生物的生长不会接触。

• 链球菌的条纹应该有3到4厘米长。
• 同样，将已知的A组和B组链球菌株作为阴性和阳性对照接种在同一平板上。
• 确保在板背面标明每条条纹的位置。
• 最后，在35°C环境空气中孵育18-24小时。

磁盘的方法

• 首先，将含有金黄色葡萄球菌β -溶解素的圆盘放在加热的血琼脂板上。
• 然后，将微生物条纹距离圆盘边缘2 ~ 3毫米。
• 最后，在35°C的CO2培养箱中培养过夜。

现场快速法

• 首先，将一滴或10 μl的CAMP液体试剂放置在假定的试剂旁边美国agalactiae在血琼脂板上生长的菌落。

注意:不要担心液体接触或吞没菌落。

• 然后，在35°C下，将平板右侧朝上孵育，以防止CAMP试剂在平板表面运行20分钟。
• 之后，用透射光检查菌落旁边的溶血强化区。
• 再次，如果最初反应为阴性，重新孵育30分钟。必要时使用手镜检查底片。
• 冷藏可增强孵育后的反应。

结果及解释

• CAMP测试:阳性测试是在葡萄球菌和测试生物体条纹的交叉点形成明显的溶血箭头。如果任何革兰氏阳性、过氧化氢酶阴性、乙型溶血球菌、耐杆菌肽、耐甲氧苄啶磺胺甲氧嘧啶出现箭头状溶血，可报告为b组链球菌(链球菌agalactiae）.
• 一个积极的反CAMP检验或磷脂酶D在两种溶血生物的交汇处用一个明显的无溶血箭头表示。c . perfringens反CAMP或磷脂酶D阳性。
• 在圆盘试验中，在β -溶血素圆盘和分离物的交叉处有明显的新月形或弧形完全溶血区，表明阳性结果。
• 在快速斑点检测中，只有在弥漫性溶血重叠处出现明显的强化溶血是阳性结果。
• 阴性测试是在被测菌落附近缺乏增强的溶血。

CAMP测试的局限性

1. 如果测试板在蜡烛罐中，在CO2气氛中，或在厌氧条件下，一些A组链球菌将CAMP测试呈阳性。因此，应采用环境空气孵育。
2. 链球菌可以给出一个可能被解释为积极的反应。当有混淆时，检查吡咯烷donyl-β-萘酰胺(PYR)试验．链球菌PYR为阳性，而美国agalactiaePYR为阴性。
3. 它有98%的检测灵敏度s . agalactiae所以CAMP测试呈阴性的菌株仍然可能是美国agalactiae可能需要进一步的测试。
4. 如果琼脂太薄或溶血，反应可能很弱。

其他CAMP测试阳性生物体

1. 单核细胞增多性李斯特氏菌
2. 红球菌属等
3. 霍乱弧菌(某些菌株)
4. 某些品种的棒状杆菌属。

反向CAMP测验

反CAMP测试是一种反应，其中葡萄球菌的β -溶血素通过磷脂酶C或D的生产被抑制美国agalactiae，李斯特菌，棒状杆菌属仕达屋优先计划,梭状芽胞杆菌perfringens．

如果反向CAMP测试呈阳性，则在被测生物体与葡萄球菌的交界处形成无溶血箭头。

参考文献和进一步阅读

• 贝利和斯科特的诊断微生物学，福布斯，第11版
• 科尼曼的彩色图集和诊断微生物学教科书
• 临床微生物程序手册，第四版。(2016)。在临床微生物程序手册，第四版．美国微生物学会。https://doi.org/10.1128/9781555818814