真菌染色方法及用途

真菌染色技术有助于清晰可视化地研究真菌的形态特征,有助于真菌的检测和鉴定,从而在真菌感染的诊断中发挥重要作用。真菌染色技术可188金宝搏百度贴吧大致分为湿法染色和鉴别染色。

湿贴是一种真菌染色技术,通过将标本悬浮在试剂溶液中,并在显微镜下观察显微镜.氢氧化钾(KOH)湿贴法、乳酚棉蓝(LPCB)染色法、印度墨水染色法或黑松香染色法、钙氟白色染色法、PHOL染色法、中性红染色法、重氮蓝b (DBB)染色法是真菌鉴定的几种湿贴法。

差异染色是一种真菌染色技术,使用多个染色。颜色对比有助于识别生物体。用于真菌鉴定的不同类型的差异染色有苏木精和伊红(HE)染色、May-Grunwald Giemsa (MGG)染色、diffquick染色、周期性酸-希夫(PAS)染色、Gridley真菌染色、Gromori甲基胺银染色、Mayer muccarmine染色、Masson-Fontana (MF)染色、Schmorl黑色素染色、甲苯胺蓝O染色、吖啶橙染色和荧光抗体染色。革兰氏染色法和改良的抗酸染色法也可用于真菌分离株的鉴定。

氢氧化钾(KOH

KOH湿贴法(真菌染色法)
酵母和菌丝在KOH湿装上
图片来源:弗雷德里克

氢氧化钾(KOH)是一种强碱,它可以消化溶解皮肤、头发、指甲或痰样本中的组织物质,以便清晰地观察真菌。根据临床标本的不同,氢氧化钾湿垫可在载玻片或管上制备。

它是鉴定临床样品中真菌元素的主要筛选方法。KOH湿贴有助于诊断脚气(癣)188188金宝搏 chromoblastomycosis,皮炎芽生菌感染等。

阅读更多:KOH湿装制剂。

乳糖酚棉蓝

LPCB
黄曲霉在LPCB
图片来源:尤里

乳酚棉蓝(LPCB)湿贴装制备是一种广泛应用的常规实验室技术。苯酚作为消毒剂杀死真菌,乳酸保持真菌形态,甘油防止干燥,棉花蓝染色真菌的外壁。这是在两种方式执行:标准挑逗mount和玻璃纸胶带。

LPCB湿式支架检测和鉴定培养基中的真菌。LPCB将真菌元素染成蓝色。

阅读更多:LPCB湿式安装

革兰氏染色剂

革兰氏染色法是检测细菌的差分方法,但它也有助于识别真菌。真菌呈革兰氏阳性(紫色)。在检查临床标本时,检测真菌元素(菌丝、酵母或菌丝)有助于我们诊断真菌感染。

有两种革兰氏染色法用于组织染色。

  • 威格特对革兰氏染色的改良有助于识别肺孢子菌囊肿。
  • Brown和Brenn对革兰氏染色进行了改良,用于鉴别诺卡氏菌属放线菌而且Microsporidiumspp。

印度墨水和黑松子染料

印墨真菌染色技术
隐球菌胶囊染色阴性
图片来源:林根实验室

印墨和黑松香染料是用于阴性染色的酸性染料。印墨或黑松香染色剂都有助于染色胶囊.黑胶染色优于印染,因为它可以持续一年以上,溶液中不会出现碳颗粒。

这些染色剂检测囊状真菌,如新型隐球菌导致隐球菌性脑膜炎。胶囊在黑暗背景下呈现出清晰的光晕。

钙氟白色污渍

钙氟白色污渍
用氟钙白染色法对酵母进行荧光染色
图片来源:Kunetskiy

钙氟白色污渍是一种荧光染料,可以染色真菌细胞壁中的几丁质。它是一种水溶性无色染料和荧光增白剂。当暴露在紫外线下时,它会发出浅蓝色的荧光荧光显微镜

钙荧光白染色用于检测菌丝、假菌丝和酵母。在荧光显微镜下观察,真菌发出绿色荧光。它还有助于检测不可培养的真菌,如卡式肺

苏木精和伊红染色

苏木精和伊红染色
苏木精和伊红染色显示曲霉属真菌spp。
图片来源:DOI:10.1002 / lary.25429

苏木精使细胞核染成蓝色,伊红使细胞质染成粉红色。H和E染色有助于区分细胞核和细胞质部分。苏木精染色核成分,如异染色质和核仁。伊红染色细胞质成分,如胶原蛋白、弹性纤维、肌肉纤维和红细胞。

苏木精-伊红染色用于检查组织冷冻切片、细针抽吸和石蜡固定包埋组织。当怀疑有癌症时,它可以用于检查活检样本。H和E染色可显示菌丝、酵母细胞(细胞核)、双屈光细胞壁芽生菌,球体球孢子菌属

May-Grunwald Giemsa染色

May Grunwald- giemsa染色剂由两种染色剂制成,May Grunwald染色剂和吉姆沙染色剂.5月格伦沃尔德染色由亚甲基蓝和伊红组成。吉姆萨染色由亚甲基蓝、伊红和天蓝色B组成。

May-Grunwald Giemsa染色检测荚膜组织胞浆菌在外周血涂片中。这种染色技术染色血液和骨髓涂片。血细胞的差异计数可以是一个。它有助于观察染色体和识别肥大细胞。

Diff-Quik污点

Diff-Quick染色由固定液、染色液I和染色液II组成。这是一种“浸”染,用的是科普林瓶。它是在对Wright Giemsa染色进行改进的基础上进行的。Diff-Quick染色比Wright Giemsa染色好,因为4分钟的过程在15秒内完成。

Diff-Quick染色用于快速染色和区分涂片,如血液和阴道涂片。真菌呈深蓝色。

周期性酸希夫染色

PAS染色法(真菌染色法)
周期性酸-希夫显示真菌菌丝
图片来源:DOI:10.1155 / 2011/821259

周期性酸-希夫(PAS)是一种染色技术,可以识别组织中糖原、多糖和粘蛋白的存在。这些组织切片可以用福尔马林固定、石蜡包埋或冷冻。PAS将细胞核染成蓝色,真菌染成深粉色或洋红色。

PAS染色可用于鉴别新型隐球菌荚膜组织胞浆菌来自烟曲霉属真菌,芽生菌因为它们的细胞壁和胶囊含有大量的碳水化合物。

格里德利真菌染色

格里德利真菌染色类似PAS染色,但使用铬酸作为氧化剂。该技术结合了Bauer, Schiff和醛紫红素技术。

格里德利真菌染色固定组织切片。菌丝和分生孢子染成深紫色,弹性组织和粘蛋白底色染成黄色。它不会染色放线菌。

蛾蛾银染色剂

Gomori’s methenamine silver stain (GMS)用于显示真菌组织切片中的多糖含量。最广泛使用的染色剂是Grocott对GMS染色剂的改良,称为Grocott’s Gomoris Methenenamine Silver染色剂。GMS染色也可以对退化和不可活的真菌进行染色。它将真菌和细菌染成黑色,粘多糖染成深灰色,组织染成浅绿色。

GMS染色鉴定耶氏肺孢子菌,这导致了肺囊虫病。

梅耶尔粘卡明染色

梅耶尔的Mucicarmine染色粘蛋白,一种由不同上皮细胞产生的分泌物。在癌或某些炎症中,上皮细胞产生过量的粘蛋白。

梅耶尔Mucicarmine染色检测隐球菌而且鼻孢子虫属组织中的细菌。它弄脏了隐球菌胚芽深玫红色,细胞核黑色,组织呈黄色。在鼻孢虫病的情况下,粘卡明染色孢子囊和孢子内。

Masson-Fontana污点

马森-丰塔纳(MF)染色检测细胞的银金蛋白颗粒和黑色素。用于检查冷冻或石蜡包埋的组织切片。黑色素是一种棕色、黑色的色素,也存在于人体的头发、皮肤、视网膜和虹膜中。阿根廷金颗粒存在于类癌肿瘤中。Mosson-Fontana染色黑色素和银金蛋白颗粒为黑色,核为红色。

马森-丰塔纳(MF)染色检测含黑色素的灰褐色(phaeoid)真菌样Curvularia lunata而且Bipolaris hawaiiensis在组织。

施莫尔黑色素染色

施莫尔黑色素染色法是以黑色素为基础,检测组织中是否存在黑色素、角蛋白、角透明蛋白等还原性物质的染色方法。黑色素存在于灰质(phaeoid)真菌的细胞壁中。该技术利用黑色素的还原性将颗粒染成蓝绿色。它使细胞核染成粉红色,使细胞质染成淡粉色。

黑素染色在组织活检中可用于黑丝菌病的诊断。

甲苯胺蓝O染色

甲苯胺蓝是一种异色染料。它能在大约10-20秒内迅速染色冷冻组织部分。甲苯胺蓝O染色染色囊肿卡式肺浅蓝色背景下的红蓝色或深紫色。它只检测囊肿形式,不检测滋养体形式。

甲苯胺蓝O染色可用于检测卡式肺在肺活检和支气管肺泡灌洗液中

吖啶橙渍

吖啶橙染色是结合细胞核酸的荧光染料。当真菌用吖啶染料染色并在紫外线下观察时,RNA发出橙红色荧光,DNA发出绿色荧光。DNA和RNA的区别染色需要pH值为6。吖啶橙染色的人上皮细胞,炎症细胞,和背景碎片,显示浅绿色到黄色。

吖啶橙染色可在组织切片上显示真菌,并可快速涂抹。它也有助于鉴定真菌曲霉属真菌仕达屋优先计划.,皮炎芽生菌白色念珠菌球孢子菌属巨细胞新型隐球菌荚膜组织胞浆菌,鼻孢子虫属seeberi在组织切片中。

上的污点

荧光抗体染色是一种用荧光色素标记抗体的抗原检测试验。它检测真菌抗原在脓液,血液,脑脊液,和石蜡切片的福尔马林固定组织。

荧光抗体在检测中是有用的孢子丝菌schenckii曲霉属真菌spp。皮炎芽生菌Cocciodioides巨细胞新型隐球菌荚膜组织胞浆菌,等。

PHOL污点

PHOL染色源于科学家的名字Pal、长谷川、小野和李。LPCB和PHOL具有相似的功能,但在染色成分上有所不同。在PHOL染色中,福尔马林代替苯酚,亚甲基蓝代替棉蓝。

PHOL染色可用于真菌分离株的检测Prototheca物种。

中性红色

中性红染料是一种水溶性染料。它可以穿过完整的质膜,活细胞的溶酶体可以储存它。当细胞膜和溶酶体被破坏时,染料的吸收减少。

中性红染色用于区分活菌和非活菌。通过显微镜观察和真菌培养诊断皮肤真菌病。直接显微镜观察有时可以观察到真菌,但在培养基中可能无法生长。在这种情况下,中性染色有助于了解真菌是否存活,因为它会将存活的细胞染成红色,而不会将非存活的细胞染成红色。

重氮蓝B染色

重氮蓝B染色(DBB)用于区分两个属的真菌,担子菌和子囊菌的种类。DBB阳性会染成暗红色或紫红色,而DBB阴性不会染红。

重氮蓝B染色鉴别毛孢子菌属担子菌属(SPP)地丝菌属spp。(子囊菌)。毛孢子菌属sp .为DBB阳性地丝菌属sp .为DBB阴性。

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Sushmita Baniya

大家好,我是来自尼泊尔的Sushmita Baniya。我是医学微生物学硕士研究生。我对遗传学和分子生物学感兴趣。金宝搏beat亚洲体育真人荷官

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