抗原-抗体反应:凝集和类型-微生物在线

抗原-抗体反应的一般特征

反应是具体的；抗原只与其同源抗体结合，反之亦然。然而特异性并不是绝对的，由于抗原相似或相关可能发生交叉反应。
整个分子反应而不分裂。
在反应过程中，抗原或抗体没有变性。
这种结合发生在表面，因此是表面抗原与免疫相关。
这种结合是牢固的，不可逆的。联盟的牢固性受到反应的亲和度和亲和度。
1. 亲和性是指抗原和抗体分子之间相互吸引的强度。它是表位和副位(其抗体的抗原结合区域)之间的紧密匹配的函数。
2. 亲和性是抗原-抗体复合物形成后结合的强度。它反映了抗血清中各抗体分子的整体结合性质，与抗原的多个表位具有不同的亲和常数。
抗原和抗体可以以不同的比例结合，不像化学物质的固定价。抗原和抗体都是多价的，抗体通常是二价的IgM分子可能有5个或10个结合点．抗原的价码可能高达数百。

前带现象

在高抗体浓度下，抗体结合位点的数量可能大大超过抗原中存在的表位的数量。因此，大多数抗体只能结合单价抗原而不是多价抗原。结合单价抗原的抗体不能将一个抗原交联到另一个抗原上。

通过在不同的抗体(或抗原)浓度下进行测定，Prozone效应很容易诊断。当你稀释到最佳抗体浓度时，你会看到更高水平的凝集。当使用多克隆抗体时，不完全抗体也会引起prozone效应。凝集反应抗体和颗粒抗原之间的相互作用导致可见的结块称为凝集。产生这种反应的抗体叫做凝集素。与IgG抗体相比，IgM抗体的凝集效果更好。过量的抗体也抑制凝集反应;这种抑制被称为前带现象。

对于抗体的检测，凝集比沉淀更敏感。
当抗原和抗体反应的比例相等时，凝集发生最佳。

当抗体或抗原过量时，就会出现原zone现象。不完全抗体或单价抗体虽然与抗原结合，但不会引起凝集。它们可以作为阻断抗体，抑制随后添加的完全抗体的凝集。

凝集的类型

玻片凝集:血清分型。
管凝集:例如维达尔试验。
间接(被动凝集):可溶性抗原包被载体颗粒，如乳胶颗粒，红细胞。

幻灯片凝集

在载玻片或瓦片上的一滴生理盐水中，加入一滴适当的抗血清，使颗粒抗原平滑、均匀地悬浮，就会发生凝集。
一个积极的结果表明，聚集在一起的颗粒和清除的下降。根据血清滴度的不同，凝集可立即发生，也可在几秒钟内发生。
一分钟后发生结块可能是由于液体干燥引起的，应不予考虑。
在同一张载玻片上，必须有一个由盐水中的抗原悬液组成的对照，不含抗血清，以确保抗原不会自凝集。
玻片凝集法是临床标本中许多细菌分离株鉴定的常规方法。它也是用于血型分组和交叉匹配的方法。

试管凝集

这是测定抗体的标准定量方法。

当固定体积的颗粒抗原悬浮液加入到等体积的连续稀释的抗血清在试管中，可以估计血清的凝集效价。

试管凝集法通常用于伤寒、布鲁氏菌病及斑疹伤寒的血清学诊断(韦尔-菲利克斯反应）.

维达尔试验

该过程包括将死亡的伤寒细菌细胞悬浮液添加到一系列含有患者血清的管道中，这些血清已被稀释到不同的浓度。试管在37°C下孵育30分钟后，将其离心并检查已发生的凝集量。可见到凝集的最高稀释度的倒数被指定为抗体效价病人的血清。例如，如果发生凝集的最高稀释倍数为1:20 20，则滴度为每毫升血清320个抗体单位。自然地，滴度越高，个体对疾病的抗体反应就越大。使用了两种抗原H或鞭毛抗原和O或体细胞抗原伤寒杆菌。在这里查找有关WIDAL TEST的详细信息

圆底菲利克斯管用于凝集。凝集杆菌在试管底部呈圆盘状扩散。布氏菌病的试管凝集试验可能因prozone现象和阻断抗体的存在而复杂化。应多次稀释血清，以防止因prozone而出现假阴性结果。

的韦尔-费利克斯反应n

用于斑疹伤寒血清诊断的Weil-felix反应是一种异亲性凝集试验，基于斑疹伤寒之间共享一种共同抗原rickettsiae还有一些变形杆菌。嗜异菌凝集试验的另一个例子是用于诊断原发性非典型肺炎的链球菌MG凝集试验。使用红细胞作为抗原的凝集试验的例子是保罗·邦内尔试验和冷凝集试验。原发性非典型肺炎冷凝集试验阳性。患者血清在4°C时凝集人O族红细胞，在37°C时凝集不可逆。

红血球凝聚

凝集反应通常用于测定红细胞的类型。在ABO抗原的分型中，红细胞与a或B血型抗原的抗血清混合在载玻片上。如果抗原存在于细胞上，它们就会凝集，在载玻片上形成可见的结块。确定供者和受者血液中存在哪些抗原是输血时血型匹配的基础。

粒子凝集

通过人造载体颗粒(如表面结合抗体的乳胶珠)的凝集(结块)，已经开发了许多检测抗原的程序。

乳胶凝集

抗体分子可以随机排列到乳胶(聚苯乙烯)珠的表面。被测标本中的抗原与暴露在乳胶珠表面的抗体的结合位点结合，形成乳胶珠和抗原的交联聚集体。

乳胶珠的尺寸(0.8微米或更大)提高了识别凝集反应的容易程度。
通过乳胶凝集检测到的细菌多糖水平已被证明低至1.0 ng /ml，因为溶液的pH值、渗透压和离子浓度影响所发生的结合量，在乳胶凝集程序进行的条件必须仔细标准化。
此外，体液中的一些成分，如类风湿因子，已被发现在可用的乳胶凝集系统中引起假阳性反应。为了解决这个问题。建议所有样品在测试前用煮沸或乙二胺四乙酸(EDTA)处理。
商业测试系统通常在纸板卡或玻璃载玻片上进行;应严格遵循制造商的建议，以确保准确的结果。
反应按照1+到4+的等级进行分级，2+通常是阳性样品中所见的最小凝集量。
对照乳胶(涂有来自制造特定抗体的同一动物物种的抗体)与乳胶一起测试。如果患者标本或培养分离物与测试乳胶和对照乳胶都发生反应，则该测试被认为是非特异性的，因此无法解释。
乳胶试验在临床实验室中非常流行，用于检测抗原新型隐球菌并从培养板中确认乙型溶血性链球菌的存在。乳胶测试也可用于检测链球菌agalactiae，艰难梭状芽胞杆菌毒素A和B以及轮状病毒

Coagglutination

在这种情况下，颗粒被杀死和处理金黄色葡萄球菌(Cowan I株)，在它们的细胞壁中含有大量的抗体结合蛋白，蛋白a。与乳胶颗粒相反，这些葡萄球菌只结合抗体的重链部分(Fc)的底部，使两个(Fab)抗原结合端自由形成与特定抗原的复合物。一些商业供应商已经准备了用于鉴定链球菌的凝血凝集试剂，包括Lancefield组A, B, C, D, F, G和N;链球菌引起的肺炎；脑膜炎奈瑟氏菌；N球菌；而且流感嗜血杆菌A型到F型在培养中生长。凝集反应是高度特异性的，但对于检测少量抗原可能不如乳胶凝集敏感。因此，它通常不用于直接抗原检测。

乳胶凝集抑制试验

乳胶凝集抑制试验依赖于乳胶药物偶联物和样品中可能存在的任何药物(主要是尿液)之间的抗体竞争。尿液样本被放置在含有抗体试剂、缓冲液和乳胶试剂的载玻片的混合孔中。a)如果药物不存在，乳胶-药物缀合物与抗体结合并形成大颗粒凝集。因此，凝集是尿液样本中不存在药物的证据b)如果尿液样本中存在药物，它会与乳胶偶联物竞争少量可用抗体。足够量的药物将防止颗粒和凝集的形成，阳性尿样不会改变测试混合物的外观。

库姆斯测验

直接库姆斯检测:检测患者红细胞上的不完全抗体。抗体附着在红细胞(患者红细胞)表面+抗人球蛋白=凝集。
间接库姆斯测试:患者血清抗体检测。恒河河阳性RBC +患者血清(如果含有不完全循环的抗体覆盖在RBC表面)+使桥=凝集的抗人球蛋白