细菌培养基:分类,类型,用途

媒体的定义而且复杂的媒体是微生物学中常用的两大类培养基。媒体的定义通过向蒸馏水中添加精确数量的高度纯化无机或有机化学物质来制备。因此,所定义的介质的确切组成是已知的。

复杂的媒体用微生物、动物或植物产品的消化物制备。酪蛋白(牛奶蛋白)、牛肉(牛肉提取物)、大豆(胰蛋白酶大豆肉汤)、酵母细胞(酵母提取物)或任何其他高营养但不纯的物质用于制备复杂培养基;因此,这种介质的确切成分尚不清楚。对于许多微生物的培养,这些信息也不是必需的。

培养基中含有微生物生长所必需的营养物质和物理生长参数。如果培养基满足细菌细胞的生长要求,那么该细胞将繁殖到足以肉眼可见的数量。细菌培养基可根据组成、一致性和目的。

所有微生物都不能在同一种培养基中生长;许多植物不能在任何已知的培养基中生长。不能在人工培养基中生长的生物是专性寄生麻风杆菌188app彩票 沙眼衣原体而且梅毒螺旋体专性细胞内寄生虫。

常见细菌培养基

基于一致性

文化媒介分为三种类型;固体介质,半固体介质,液体介质,根据稠度。琼脂的百分比决定了培养基的稠度。

固体培养基

固体培养基含有琼脂浓度为1.5-2.0%或其他主要的惰性固化剂。固体介质具有物理结构,并允许细菌以物理上有益或有用的方式生长(例如,菌落或条纹)。麦康基琼脂、巧克力琼脂、营养琼脂、血液琼脂等都是固体培养基的一些例子。

固体培养基的使用

各种类型的文化媒体
微生物实验室使用的不同类型的细菌培养基

半固体的读出

半固体准备好文化媒介琼脂浓度为0.5%或更低。半固态培养基具有软的蛋奶状稠度,有利于菌体的培养微量需氧的细菌或者用来确定细菌运动性运动试验介质、Stuart’s和Amies传输介质等均为半固体介质。

液体(肉汤)中等

这些培养基含有一定量的营养物质,但不含明胶或琼脂等胶凝剂。实验室常用的液体介质有;营养汤,葡萄糖汤,脑心灌注(BHI)汤碱性蛋白胨水胰蛋白酶大豆汤(TSB),亚硒酸F肉汤.肉汤培养基有多种用途,如多种生物的繁殖、发酵研究和各种其他试验。

液体培养基的使用

  • 培养细菌进行运动测试
  • 培养用于接种物生产的细菌,用于抗生素图谱测试
  • 复活从冻干或贮存培养物中复活细菌
  • 研究新陈代谢、毒素和酶的产生
  • 充实和/或运输临床材料

营养需求复杂的细菌被称为挑剔细菌。培养这种细菌必须在培养基中加入特殊的营养补充剂。具有相对基本和直接营养需求的细菌很容易在实验室中生长,它们被称为不挑剔的细菌。

基于功能使用

为了便于识别、计数和分离某些类型的细菌,需要许多特殊用途的培养基。为了满足这些需求,有许多媒体可供选择。

微生物实验室标准培养基按实际用途分为六种。他们是;通用(基础)介质、富集介质、选择性或富集介质、差异或指示介质、传输介质、厌氧介质和测定介质。

通用的媒体

营养琼脂
营养琼脂

基础培养基,也称为通用培养基,是支持大多数非挑剔细菌生长的简单培养基。蛋白胨水,营养肉汤,和营养琼脂(NA)都是基础介质。这些培养基一般用于微生物的初级分离。

丰富的媒体

血琼脂

在基础培养基中加入额外的营养物质,如血液、血清、蛋黄等,就形成了富集培养基。强化培养基用于培养营养挑剔的细菌。血琼脂、巧克力琼脂、吕弗勒血清斜度等都是浓缩培养基的几个例子。血液琼脂是通过向血液琼脂基础中添加5-10%(按体积)的血液来制备的。巧克力琼脂也称为热血琼脂或裂解血琼脂

选择性和富集介质

这些介质旨在抑制不需要的共生细菌或污染细菌,并帮助从细菌混合物中恢复病原体。选择性介质以琼脂为基础,而浓缩介质为液体。这两种媒体的目的是一样的。任何琼脂培养基都可以通过添加不影响感兴趣病原体的特定抑制剂来进行选择性。使培养基具有选择性的各种方法包括添加抗生素、染料、化学物质、改变pH值、或者两者的组合。

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有选择性的媒体

原则:差异生长抑制
选择性培养基是为了抑制某些微生物的生长而允许其他微生物生长。选择性培养基是一种以琼脂为基础的(固体)培养基,因此单个菌落可以被分离。

选择性媒体的例子包括

  1. 塞耶·马丁琼脂用于恢复淋病奈瑟氏菌包含抗生素;万古霉素,粘菌素和制霉菌素。
  2. 甘露醇盐琼脂和盐乳琼脂用来恢复S.aureus含10% NaCl。
  3. 采用碲酸钾介质进行回收C.diphtheriae含0.04%的碲酸钾。
  4. MacConkey的琼脂用于肠杆菌科成员,含有胆盐,抑制大多数革兰氏阳性细菌。
  5. 假琼脂(西三胺琼脂)用于恢复铜绿假单胞菌含有杀菌剂氰胺。
  6. 水晶紫血琼脂用于恢复链球菌含0.0002%结晶紫。
  7. Lowenstein Jensen中号用于恢复M.tuberculosis通过加入孔雀石绿,使其具有选择性。
  8. 威尔逊和布莱尔的琼脂用于康复伤寒杆菌通过添加亮绿色染料而呈现选择性。
  9. 选择性媒体,例如tcb琼脂从粪便标本中分离霍乱弧菌的细菌pH值升高(8.5-8.6),抑制大多数其他细菌。
麦康基琼脂中的LF和NLF菌落
麦康基琼脂中的乳糖发酵菌落(粉红色)和非乳糖发酵菌落(无色/苍白)

浓缩的媒体

所述富集培养基增加所述培养物中特定微生物在固体选择培养基上镀前的相对浓度。与选择性培养基不同,浓缩培养基通常用作肉汤培养基。浓缩培养基是液体培养基,也用于抑制临床标本中的共生菌。亚硒酸F肉汤,四硫酸汤,而且碱性蛋白胨水从粪便样本中提取病原体。

差动/指示器中位一个

某些培养基被设计成根据菌落颜色来识别不同的细菌。各种方法包括结合染料、代谢底物等,因此那些利用它们的细菌呈现出不同颜色的菌落。这种介质称为差动介质或指示器媒体.差动培养基允许多种感兴趣的微生物生长,但菌落形态可区分。
差动介质的例子包括:

  1. 甘露醇盐琼脂(甘露醇发酵=黄色)
  2. 血琼脂(各种溶血,即α、β、γ溶血)
  3. MacConkey琼脂(乳糖发酵罐,粉红色菌落,而非乳糖发酵罐,产生苍白或无色菌落。
  4. tcb霍乱弧菌因蔗糖发酵而产生黄色菌落)

传输媒体

临床标本采集后必须立即送往实验室,以防止污染生物或共生生物过度生长,并保持潜在病原体的活力。这可以通过使用传输媒体。这种介质防止标本的干燥(干燥),保持病原体与共生的比例,并抑制有害细菌的过度生长。其中一些媒体(Stuart 's &女朋友的)是半固态的。木炭的加入有助于中和抑制因素。

  • 卡里·布莱尔运输媒介Venkatraman Ramakrishnan (VR)培养基运输疑似霍乱患者的粪便。
  • Sach的缓冲甘油盐水被用来运送疑似患有细菌性痢疾的病人的粪便。
  • 派克培养基用于从喉部标本中转移链球菌。

厌氧媒体

厌氧菌需要特殊的培养基来生长,因为它们需要低氧含量、低氧化还原电位和额外的营养物质。

厌氧菌的培养基可能必须补充血红素和维生素k等营养物质。这种培养基也可能必须通过物理或化学方法来减少。煮沸介质可以排出任何溶解氧。加入1%的葡萄糖,0.1%的巯基乙酸,0.1%的抗坏血酸,0.05%的半胱氨酸,或红色的铁屑可以降低培养基。使用前,介质必须在水浴中煮沸,以排除任何溶解氧,然后用无菌液体石蜡密封。

罗伯逊熟肉(RCM)培养基一般用于生长梭状芽胞杆菌SPP含有2.5厘米的牛心肉柱和15毫升的营养肉汤。巯乙酸肉汤含有巯基乙酸钠,葡萄糖,胱氨酸,酵母提取物和酪蛋白水解物。

亚甲蓝或再青嘌呤是一种氧化还原电位指示剂。在还原条件下,亚甲基蓝是无色的。

分析媒体

这些培养基用于测定维生素、氨基酸和抗生素。例如,抗生素测定培养基是通过微生物测定技术来测定抗生素效力的。
其他类型的介质包括;

  • 细菌计数培养基,
  • 细菌表征培养基,
  • 维护介质等。

文化媒介的使用

媒体名称 主要目的
胆汁黄囊素琼脂(BEA 它用于D组链球菌和肠球菌的鉴别分离和推定鉴定。
胆汁牛肝素叠氮琼脂与万古霉素 这种选择性和差异化培养基通常用于从临床和监测标本中培养耐万古霉素肠球菌。
血琼脂 血琼脂用于培养挑剔的微生物。这是一种有助于分类/识别细菌基于类型溶血(α, β或无溶血)礼物。
Bordet-Gengou琼脂 它被用来隔离百日咳博德特氏菌百日咳百日咳的病原体
缓冲炭酵母提取琼脂 丰富的文化媒介军团菌仕达屋优先计划它是军团病的病原体,也被称为军团病。
用抗生素缓冲木炭酵母提取物琼脂 这种培养基是用来丰富和选择军团菌仕达屋优先计划
Campylobacter Blood琼脂 精选培养基弯曲杆菌spp。弯曲杆菌是全世界细菌性食源性腹泻的主要原因。
弯曲杆菌巯基乙酸肉汤 选择性的保存介质用于回收弯曲杆菌spp。
巧克力琼脂 的培养嗜血杆菌仕达屋优先计划和致病性奈瑟氏菌属spp。
哥伦比亚粘菌素萘啶酸(CNA)琼脂 哥伦比亚琼脂含有粘菌素和萘啶酸(CNA),是革兰氏阳性菌的选择性培养基。抗菌剂粘菌素和萘啶酸可抑制革兰氏阴性微生物。CNA琼脂用于革兰氏阳性球菌如葡萄球菌和链球菌的选择性分离。
半胱氨酸-碲酸盐血琼脂 用于隔离白喉棒状杆菌。
伊红亚甲基蓝(EMB)琼脂 乳糖发酵革兰氏阴性肠杆菌与非乳糖发酵革兰氏阴性肠杆菌的分离与鉴别。
革兰氏阴性肉汤 肠道病原体的选择性(富集)液体培养基。
Hektoen肠内(HE)琼脂 用不同的、选择性的培养基进行分离和分化沙门氏菌而且志贺氏杆菌仕达屋优先计划从其他革兰氏阴性肠杆菌。
MacConkey琼脂 常用来分离和鉴别乳糖发酵革兰氏阴性肠杆菌和非乳糖发酵革兰氏阴性肠杆菌。
麦康基山梨醇琼脂 它是一种麦康基琼脂的改性,其中乳糖已被d-山梨醇取代作为主要的碳水化合物。它被用来选择和区分大肠杆菌O157: H7来自大便标本。
甘露醇盐琼脂 MSA的主要目的是葡萄球菌的选择性分离和分化金黄色葡萄球菌来自凝固酶阴性葡萄球菌(CONS)。
纽约媒体 它是一种选择性的文化媒体淋病奈瑟氏菌。
苯乙醇(PEA)琼脂 革兰氏阳性和厌氧革兰氏阴性杆菌的选择性分离
Salmonella-Shigella琼脂 选择性地隔离沙门氏菌而且志贺氏杆菌spp。
亚硒酸汤 用于浓缩和分离沙门氏菌spp。
连四硫酸盐肉汤 选择性地隔离沙门氏菌而且志贺氏杆菌spp。
塞耶·马丁琼脂 选育培养基淋病奈瑟氏菌而且脑膜炎奈瑟氏菌
巯乙酸肉汤 它支持厌氧菌、好氧菌、微嗜氧菌和挑剔微生物的生长。
tcb琼脂 它是一种选择性和差异化的培养基,用于分离弧菌如。霍乱弧菌霍乱是全球霍乱的主要原因。
胰蛋白酶大豆肉汤 它是一种从初级琼脂板上继代培养各种细菌的富集肉汤。
木糖赖氨酸去氧胆酸(XLD)琼脂 XLD琼脂用于分离和鉴别沙门氏菌而且志贺氏杆菌来自其他革兰氏阴性肠道杆菌的SPP。

Acharya Tankeshwar

您好,感谢您访问我的博客。我是Tankeshwar Acharya。写博客是我的爱好。作为助理教授,我在尼泊尔的PAHS教授医学和护理专业的学生微生物学和免疫学。澳门金博宝188官方网站我在帕坦医院做了10多年的微生物学家。

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